logo

Αναλύσεις> Μικροσκοπική (βακτηριοσκοπική) μελέτη ενός επιχρισμένου με Gram επιχρίσματος στη διάγνωση μολυσματικών και φλεγμονωδών διεργασιών

Οι πληροφορίες δημοσιεύονται στον ιστότοπο μόνο για αναφορά. Φροντίστε να συμβουλευτείτε έναν ειδικό.
Εάν εντοπίσετε κάποιο σφάλμα στο κείμενο, εσφαλμένη ανάδραση ή λανθασμένες πληροφορίες στην περιγραφή, παρακαλούμε ενημερώστε τον διαχειριστή της ιστοσελίδας για αυτό.

Οι αναθεωρήσεις που δημοσιεύονται σε αυτόν τον ιστότοπο είναι οι προσωπικές απόψεις των ατόμων που τα έγραψαν. Μην αυτο-φαρμακοποιείτε!

Το σμέαρ στη χλωρίδα των γυναικών: τι το καθορίζει, το ρυθμό και την παθολογία

Σμήνα για τη χλωρίδα - που συχνά διορίζονται από την ανάλυση των γυναικολόγων. Τι δείχνει και ποιες παρανοήσεις υπάρχουν στο λογαριασμό του;

Αυτή η ανάλυση μπορεί να ονομαστεί "γενική". Αυτή είναι η κύρια διάγνωση, η οποία επιτρέπει στον ιατρό να επιβεβαιώσει ή να αρνηθεί την παρουσία της φλεγμονώδους διαδικασίας στον κόλπο, την ουρήθρα, τον αυχενικό σωλήνα και επίσης να συντάξει ορισμένα συμπεράσματα σχετικά με τις πιθανές αλλαγές της εμμηνόπαυσης ή κλιμακτήριο στον ασθενή.

  • μικροσκοπικό (βακτηριοσκοπικό) Gram-χρωματισμένο επίχρισμα είναι το επίσημο όνομα.
  • ένα επίχρισμα από τα γεννητικά όργανα.
  • βακτηριοσκόπηση ·
  • μικροσκοπία.

Χρησιμοποιείται για τη διάγνωση μολυσματικών και φλεγμονωδών διεργασιών. Η βακτηριοσκόπηση σας επιτρέπει να ανιχνεύετε βακτηρίδια στα γεννητικά όργανα των γυναικών: οι απλούστεροι μικροοργανισμοί - γονοκόκκοι, που προκαλούν γονόρροια, τριχομόνες - τον αιτιώδη παράγοντα της τριχομονάσης. Επίσης, ένας ειδικός στο μικροσκόπιο θα δει μερικά βακτήρια, μύκητες (Candida), κύτταρα κλειδιά (ένα σημάδι βακτηριακής κολπίτιδας). Ο τύπος του μικροοργανισμού προσδιορίζεται από το σχήμα, το μέγεθός του και επίσης εάν είναι χρωματισμένο με βαφή ή όχι, δηλαδή είναι θετικό κατά gram ή αρνητικό κατά gram.

Επιπλέον, σε ένα επίχρισμα από κάθε σημείο (που λαμβάνεται από τον κόλπο, την ουρήθρα, τον αυχενικό σωλήνα) υπολογίζεται ο αριθμός των λευκοκυττάρων στο οπτικό πεδίο. Τα περισσότερα από αυτά - τόσο πιο έντονη είναι η φλεγμονώδης διαδικασία. Εκτιμώμενη ποσότητα επιθηλίου και βλέννας. Το επίπεδο επιθήλιο είναι ιδιαίτερα άφθονο στις γυναίκες της αναπαραγωγικής ηλικίας κατά την περίοδο της ωορρηξίας - στη μέση του εμμηνορροϊκού κύκλου.

  • κολπική καντιντίαση (τσίχλα).
  • βακτηριδιακή κολπίτιδα (παλαιότερα αποκαλούμενη gardnerellosis);
  • γονόρροια;
  • τριχομονάδα.

Εάν δεν υπάρχουν σαφή σημάδια μιας από αυτές τις ασθένειες, αλλά ένα επίχρισμα είναι κακό, διεξάγεται μια εις βάθος μελέτη του υλικού - εκτελείται αναρρόφηση.

Λόγοι για την εκτέλεση σποράς στη γυναικολογία

  1. Εάν υπάρχει μέτριος ή μεγάλος αριθμός λευκοκυττάρων σε ένα επίχρισμα, αλλά ο αιτιολογικός παράγοντας της λοίμωξης δεν είναι γνωστός. Από τη μικροσκοπία, υπάρχει ένα χαμηλότερο όριο ανίχνευσης μικροοργανισμών: 10 έως 4 - 10 έως 5 μοίρες.
  2. Εάν ανιχνευθεί μικρόβιο, να προσδιοριστεί η ευαισθησία του στα αντιβιοτικά.
  3. Εάν υπάρχουν σημεία μυκητιασικής λοίμωξης. Για να προσδιορίσετε με ακρίβεια τον τύπο των μυκήτων και να συνταγογραφήσετε ένα αποτελεσματικό αντιμυκητιακό φάρμακο.

Άλλοι τύποι μυκήτων Candida δεν μπορούν να αντιμετωπιστούν εάν δεν υπάρχουν παθολογικά συμπτώματα.

Εάν εντοπιστούν κλειδιά (σημεία βακτηριακής κολπίτιδας), αλλά υπάρχουν και άλλα μικρόβια. Για αναγνώριση.

Ποιες είναι οι διαφορές μεταξύ του ύδατος, του επιχρίσματος στη χλωρίδα και του βαθμού καθαρότητας του κόλπου;

Στη μέθοδο έρευνας. Με μια γενική επιδερμίδα, το υλικό που εναποτίθεται σε ένα κομμάτι γυαλιού χρωματίζεται με ειδικές βαφές και βλέπει κάτω από ένα μικροσκόπιο. Και όταν γίνεται βακτηριολογική έρευνα (μικροκαλλιέργεια, καλλιέργεια, μικροβιολογία), αρχικά "σπέρνεται" σε θρεπτικό μέσο. Και έπειτα, μετά από μερικές ημέρες, κοιτάζουν κάτω από ένα μικροσκόπιο - ποιες αποικίες μικροοργανισμών έχουν αυξηθεί.

Δηλαδή, αν μιλάμε για ρητή ανάλυση, θα έχετε τη γνώμη μόνο για τον αριθμό των λευκοκυττάρων, του επιθηλίου και της βλέννας. Η σπορά δεν είναι επείγουσα

Επίσης με τη μικροσκοπία, μπορείτε να καθορίσετε γρήγορα τον βαθμό καθαρότητας από τον κόλπο. Εδώ, ο γιατρός αξιολογεί μόνο τη σχέση μεταξύ φυσιολογικής, υπό όρους παθογόνου και παθογόνου μικροχλωρίδας.

Κλασική αξιολόγηση της καθαρότητας του κόλπου.

Τι οι γιατροί δεν βλέπουν με μικροσκοπία

  1. Εγκυμοσύνη Για να το προσδιορίσετε, δεν χρειάζεται ένα επίχρισμα και δεν έχει σημασία τι αποτέλεσμα θα δείξει. Πρέπει να περάσετε μια εξέταση αίματος για hCG, να υποβληθείτε σε γυναικολογική εξέταση από γιατρό ή υπερηχογράφημα της μήτρας. Μπορείτε να αναγνωρίσετε τη χοριακή γοναδοτροπίνη στα ούρα, αλλά όχι στην απόρριψη από τα γεννητικά όργανα!
  2. Καρκίνος της μήτρας και του τραχήλου. Για τη διάγνωση ενός κακοήθους εκφυλισμού του ενδομητρίου απαιτείται ιστολογικό υλικό και σε μεγάλες ποσότητες. Και το παίρνετε απευθείας από τη μήτρα με ξεχωριστή διαγνωστική κούραση.

Ο καρκίνος του τραχήλου της μήτρας και άλλες παθολογίες (διάβρωση, λευκοπλακία, koilocytosis, HPV βλάβη, άτυπα κύτταρα, κλπ.) Βασίζονται στα αποτελέσματα μιας κυτταρολογικής μελέτης. Αυτή η ανάλυση λαμβάνεται απευθείας από τον τράχηλο, από τη ζώνη μετασχηματισμού, σύμφωνα με μια συγκεκριμένη μέθοδο με χρώση Papanicolaou (εξ ου και το όνομα της ανάλυσης - η δοκιμή PAP). Ονομάζεται επίσης και ογκοκυτολογία.

  • Δεν εμφανίζει τέτοιες λοιμώξεις (zppp) ως:
    • έρπης.
    • χλαμύδια (χλαμύδια);
    • μυκοπλάσματα (μυκοπλάσμωση);
    • ουρεπλάσμα (ουρεαπλασμό);
    • HIV
  • Οι πρώτες τέσσερις λοιμώξεις διαγιγνώσκονται με PCR. Και για να καθοριστεί η παρουσία του ιού της ανοσολογικής ανεπάρκειας με επίχρισμα με υψηλή ακρίβεια είναι αδύνατη. Πρέπει να περάσετε μια εξέταση αίματος.

    Πώς να προετοιμαστείτε για την ανάλυση και πότε χρειάζεται

    Ένας γιατρός παίρνει ένα επίχρισμα από έναν ασθενή σε μια γυναικολογική καρέκλα (ανεξάρτητα από το αν είναι έγκυος ή όχι) χρησιμοποιώντας ένα ειδικό πινέλο ή το στείρο κουτάλι της Volkmann. Δεν βλάπτει καθόλου και πολύ γρήγορα.

    Είναι τεχνικά εφικτό να επιτύχετε ένα καλό, ακόμη και τέλειο επίχρισμα εάν απολυμαίνετε τον κόλπο σας με χλωρεξιδίνη ή μιραμιστίνη, για παράδειγμα. Αλλά ποιο είναι το σημείο;

    • ντους;
    • έχουν σεξ?
    • χρησιμοποιήστε προϊόντα κολπικής υγιεινής, οικιακά αποσμητικά και φάρμακα, εάν δεν έχουν συνταγογραφηθεί από γιατρό.
    • Κάντε υπερηχογράφημα χρησιμοποιώντας έναν κολπικό καθετήρα.
    • υποβάλλονται σε κολποσκόπηση.
    • πριν επισκεφθείτε έναν γυναικολόγο ή ένα εργαστήριο, για 3 ώρες, δεν πρέπει να ουρείτε.

    Η δωρεά εγκεφαλικών επεισοδίων πρέπει να εμμηνορροϊκή αιμορραγία. Ακόμα κι αν υπάρχει μόνο μια «χαλάρωση» την τελευταία ημέρα της εμμήνου ρύσεως, είναι καλύτερο να αναβληθεί η μελέτη, καθώς το αποτέλεσμα είναι πιθανόν να είναι κακό - θα αποκαλυφθεί ένας μεγάλος αριθμός λευκών αιμοσφαιρίων.

    Δεν απαγορεύεται η λήψη αλκοόλ.

    Μπορώ να πάρω ένα επίχρισμα κατά τη λήψη αντιβιοτικών ή αμέσως μετά τη θεραπεία; Δεν είναι επιθυμητό να το κάνετε αυτό εντός 10 ημερών μετά τη χρήση τοπικής δράσης φαρμάκων (κολπική) και ένα μήνα μετά τη λήψη από το στόμα αντιβακτηριακών παραγόντων.

    Προετοιμασμένη μικροσκοπική εξέταση:

    • συνήθως όταν επισκέπτεστε έναν γυναικολόγο?
    • μετά την εισαγωγή στο γυναικολογικό νοσοκομείο.
    • πριν την εξωσωματική γονιμοποίηση
    • κατά τη διάρκεια της εγκυμοσύνης (ειδικά εάν ένα επίχρισμα είναι συχνά κακό)?
    • εάν υπάρχουν παράπονα: ασυνήθιστη απόρριψη, κνησμός, πυελικό άλγος κ.λπ.

    Ερμηνεία των αποτελεσμάτων: τι να εξετάσει ο κανόνας και τι - παθολογία στην μικροχλωρίδα

    Αρχικά, εφιστούμε στην προσοχή σας ένα τραπέζι στο οποίο εμφανίζονται οι δείκτες του λεγόμενου πρώτου βαθμού καθαρότητας. Δεν υπάρχει καμία αναφορά στην ουρήθρα σε αυτήν (αν και το υλικό έχει επίσης ληφθεί από εκεί), αφού μιλάμε για γυναικολογικές παθήσεις. Η φλεγμονώδης διαδικασία στην ουρήθρα αντιμετωπίζεται από έναν ουρολόγο.

    Επιθήλιο - ο αριθμός των επιθηλιακών κυττάρων δεν μετράται, δεδομένου ότι δεν έχει διαγνωστική αξία. Αλλά πολύ λίγο από το επιθήλιο μιλάει για ένα ατροφικό τύπο επιχρίσματος - αυτό συμβαίνει στις γυναίκες κατά την εμμηνόπαυση.

    Τα λευκοκύτταρα - θεωρούνται στο «οπτικό πεδίο»:

    • όχι περισσότερο από 10 - ένα μικρό ποσό?
    • 10-15 - μέτρια ποσό?
    • 30-50 - ένας μεγάλος αριθμός, η γυναίκα παρατηρεί τα παθολογικά συμπτώματα και ο γιατρός κατά τη διάρκεια της επιθεώρησης διαγνώσκει τη φλεγμονώδη διαδικασία στον κόλπο και / ή στον τράχηλο.

    Η βλέννα (σκέλη της βλέννας) - κανονικά θα πρέπει να είναι παρούσα, αλλά ένας μεγάλος αριθμός συμβαίνει με φλεγμονή. Στη βλέννη της ουρήθρας δεν πρέπει να είναι.

    Βακτηριακή χλωρίδα ή γαλκομορτυπία - ο κανόνας, είναι η προστασία του κόλπου από τα μικρόβια.

    Οι τριχομονάδες, οι γονοκοκκικοί και τα κλειδιά των κυττάρων σε μια υγιή γυναίκα στον τράχηλο και τον κόλπο δεν πρέπει να είναι. Η Candida απουσιάζει επίσης. Τουλάχιστον σε μια σημαντική ποσότητα, η οποία ανιχνεύεται στην ανάλυση της χλωρίδας.

    Το επίθεμα δεν είναι μεγάλο. Αλλά αν μια γυναίκα εισέλθει στο νοσοκομείο, τότε παίρνουν φρέσκο ​​από εκεί ακριβώς, κατά τη διάρκεια της αρχικής εξέτασης στην καρέκλα.

    Συνήθως τα αποτελέσματα είναι έγκυρα 7-14 ημέρες. Επομένως, εάν πρέπει να το περάσετε πριν από την επέμβαση, το κάνετε 3 ημέρες πριν την εισαγωγή στο νοσοκομείο. Η τελευταία από τις δοκιμές που έχει αποδοθεί.

    Τι βρίσκεται στο bacposseve

    Ο γυναικολόγος θα μπορέσει να αποκρυπτογραφήσει καλύτερα το αποτέλεσμα της πολιτιστικής έρευνας. Αλλά εσείς οι ίδιοι, εάν διαβάσετε τις παρακάτω πληροφορίες, προσπαθήστε να υπολογίσετε την ανάλυσή σας.

    Ο αριθμός των μικροοργανισμών μπορεί να εκφραστεί με "διασταυρώσεις":

    • "+" Είναι ένα μικρό ποσό?
    • Το "++" είναι ένα μέτριο ποσό.
    • "+++" είναι ένας μεγάλος αριθμός?
    • "++++" - άφθονη χλωρίδα.

    Αλλά πιο συχνά ο αριθμός των εκπροσώπων μικροχλωρίδας εκφράζεται σε βαθμούς. Για παράδειγμα: Klebsiella: 10 έως 4 μοίρες. Παρεμπιπτόντως, αυτός είναι ένας από τους εκπροσώπους των εντεροβακτηρίων. Γραμ αρνητικός ραβδισμός, αερόβιος μικροοργανισμός. Ένα από τα πιο επικίνδυνα παθογόνα, αν και είναι μόνο ευκαιριακό. Αυτό οφείλεται στο γεγονός ότι η Klebsiella είναι ανθεκτική (ανθεκτική) στους περισσότερους αντιβακτηριακούς παράγοντες.

    Παρακάτω περιγράφουμε άλλους κοινούς όρους που βρίσκονται στα αποτελέσματα μιας μελέτης ή μπορείτε να ακούσετε από γιατρό.

    Soor - είναι candida ή με άλλο τρόπο - τσίχλα. Αντιμετωπίζεται με αντιμυκητιακά (αντιμυκητιακά) φάρμακα.

    Μυκητοειδείς μύκητες βλαστοσπορίων και ψευδομυελίλιο - καντιντίαση ή άλλη μυκητιασική νόσο, που συνήθως αντιμετωπίζονται παρομοίως με τσίχλα.

    Διαφορετικοί - υπό όρους παθογόνοι μικροοργανισμοί, σύμφωνα με τα αποτελέσματα των ερευνών των επιστημόνων, στις περισσότερες γυναίκες είναι περίπου 10% της μικροχλωρίδας, καθώς και οι στρεπτόκοκκοι, οι σταφυλόκοκκοι, η E. coli, η γαρννερέλα. Αν η χλωρίδα διαταραχθεί, ο αριθμός τους αυξάνεται.

    Το Leptotrix είναι ένα αναερόβιο gram-αρνητικό βακτήριο που προκαλεί λεπτωτρίωση. Διαβάστε περισσότερα σχετικά με αυτό σε αυτό το άρθρο.

    Η ανάμικτη χλωρίδα είναι μια παραλλαγή του κανόνα, εάν δεν υπάρχουν συμπτώματα της νόσου, πλήρως λευκοκύτταρα ή η έντονη αύξηση τους (40-60-100). 15-20 είναι μια παραλλαγή του κανόνα, ειδικά κατά τη διάρκεια της εγκυμοσύνης.

    Οι εντερόκοκκοι (Enterococcus) είναι εκπρόσωποι της εντερικής μικροχλωρίδας, οι οποίοι μερικές φορές εισέρχονται στον κόλπο. Gram θετικοί κόκκοι. Σχετικά με το enterococcus fecalis (Enterococcus faecalis) γράψαμε νωρίτερα. Υπάρχει επίσης enterococcus coli - Ε. Coli. Συνήθως προκαλούν δυσάρεστα συμπτώματα σε συγκέντρωση πάνω από 10 σε 4 μοίρες.

    Το Pseudomonas aeruginosa είναι ένα gram-αρνητικό βακτήριο. Συχνά προσβάλλει άτομα με χαμηλή ασυλία. Έχει καλή αντίσταση στα αντιβιοτικά, γεγονός που περιπλέκει τη διαδικασία θεραπείας.

    Ο πολυμορφικός βακίλος είναι ένας κοινός αντιπρόσωπος της κολπικής βιοκεννότητας. Εάν ο αριθμός των λευκοκυττάρων είναι φυσιολογικός και δεν υπάρχουν παράπονα, η παρουσία του δεν πρέπει να ενοχλεί.

    Τα ερυθροκύτταρα - μπορεί να είναι σε μικρές ποσότητες σε ένα επίχρισμα, ειδικά αν έχουν ληφθεί κατά τη διάρκεια της φλεγμονώδους διαδικασίας ή όταν υπήρχε μικρή κηλίδωση.

    Κοκκία ή κοκκοβακτηριακή χλωρίδα - συνήθως κατά τη διάρκεια μιας μολυσματικής διαδικασίας στον κόλπο ή στον τράχηλο. Εάν μια γυναίκα έχει καταγγελίες, απαιτείται αντιβακτηριακή θεραπεία - κολπική απολέπιση.

    Οι Διπλόκοκοι είναι ένας τύπος βακτηρίων (κοκκία). Σε μικρό ποσό, μην προκαλείτε βλάβη. Με εξαίρεση το gonokokkov - παθογόνα γονόρροια. Είναι πάντα αντιμετωπίζεται.

    Και τελικά θα αναφερθούμε σε συχνές συντομογραφίες που γράφονται στο κενό των αποτελεσμάτων της ανάλυσης:

    • L - λευκοκύτταρα.
    • Ep - επιθήλιο;
    • Pl. ep. - πλακώδες επιθήλιο,
    • Gn (gn) -monococcus, ο αιτιολογικός παράγοντας της γονόρροιας,
    • Trich - trichomonas, ο αιτιολογικός παράγοντας της τριχομονάζης.

    Με γραμματικό επίχρισμα

    Βιολογία και Ιατρική

    Ανάλογα με τη δομή του κυτταρικού τοιχώματος, οι προκαρυώτες που ανήκουν στα ευβακτήρια διαιρούνται σε δύο μεγάλες ομάδες. Διαπιστώθηκε ότι εάν τα σταθερά κύτταρα των ευακτηρίων κατεργάστηκαν πρώτα με κρυσταλλικό ιώδες και μετά με ιώδιο, σχηματίστηκε ένα χρωματισμένο σύμπλεγμα. Στην επακόλουθη επεξεργασία αλκοόλης ανάλογα με την τύχη της δομής του κυτταρικού τοιχώματος του συμπλόκου είναι διαφορετική: οι λεγόμενες gram-θετικά είδη του συμπλόκου συγκρατείται από το κύτταρο και η τελευταία παραμένει έγχρωμο, σε Gram-αρνητικά είδη, αντιθέτως, έγχρωμο σύμπλοκο εκπλένεται από τα κύτταρα και αποχρωματίζει. (Η μέθοδος αυτή προτάθηκε για πρώτη φορά το 1884 από τον Δανό επιστήμονα Η. Gram (Ch. Gram), ο οποίος ασχολήθηκε με τη βαφή ιστών, αργότερα χρησιμοποιήθηκε για βακτήρια).

    Σε ορισμένα ευβακτήρια, μια θετική αντίδραση όταν χρωματίζεται με τον τρόπο που περιγράφεται παραπάνω είναι χαρακτηριστική μόνο των κυττάρων που βρίσκονται στο στάδιο της ενεργού ανάπτυξης. Διαπιστώθηκε ότι το βαμμένο σύμπλοκο σχηματίζεται επί του πρωτοπλάστη, αλλά η συγκράτηση αυτού από το κύτταρο ή η έκπλυση από αυτό κατά τη διάρκεια της επακόλουθης επεξεργασίας με αλκοόλη καθορίζεται από τα δομικά χαρακτηριστικά του κυτταρικού τοιχώματος.

    Η χρώση των φαρμάκων αυξάνει την ευαισθησία της μικροσκοπίας, καθώς τα μη βαμμένα βακτήρια είναι ελάχιστα διακριτά ακόμη και με αύξηση 400-1000.

    Ο διαφορικός χρωματισμός Gram είναι ο συνηθέστερος, αν και χρησιμοποιείται μονόχρωμη χρώση. Gram χρώση διαφοροποιεί βακτήρια των οποίων το κυτταρικό τοίχωμα είναι παχύ σχεδόν εξ ολοκλήρου αποτελείται από πεπτιδογλυκάνη (θετικό κατά gram) βακτηρίδια των οποίων το κυτταρικό τοίχωμα εκτός από ένα λεπτό στρώμα πεπτιδογλυκάνης έχει μία εξωτερική μεμβράνη που αποτελείται από λιποπρωτεϊνών και λιποπολυσακχαρίτες (Gram). Βασικές χρωστικές (π.χ., κρυσταλλικό ιώδες) είναι σταθερά στερεωμένη στο τοίχωμα των Gram-θετικών βακτηρίων, του δίνει μια μπλε-μαύρο χρώμα, και είναι εύκολα έπλυνε με αλκοόλη (ή ακετόνη) από το τοίχωμα των Gram-αρνητικών βακτηρίων, μετά την οποία θα dokrashivayutsya χρωστική αντίθεσης (π.χ., σαφρανίνη) σε κόκκινο χρώμα.

    Η χρώση με Gram είναι απαραίτητη για τη μελέτη των επιχρισμάτων των πτυέλων. Εάν τα πτύελα λαμβάνονται σωστά, τουλάχιστον 25 ουδετερόφιλα και λιγότερα από 10 επιθηλιακά κύτταρα εμφανίζονται στο οπτικό πεδίο σε χαμηλή μεγέθυνση. Ένας μεγαλύτερος αριθμός επιθηλιακών κυττάρων και μια ποικιλία τύπων βακτηριδίων υποδεικνύει ότι τα πτύελα μολύνονται με τα περιεχόμενα του στοματοφάρυγγα. Αν και είναι συχνά δύσκολο να γίνει διάκριση μεταξύ της φυσιολογικής μικροχλωρίδας και των παθογόνων βακτηρίων, οι κηλίδες των κηλίδων του Gram δίνουν πολύτιμες πληροφορίες εάν το παθογόνο βακτήριο έχει οποιαδήποτε ένδειξη για αυτό (βιολογικό σήμα). Για παράδειγμα, σε βακτηριακή κολπίτιδα, επιθηλιακά κύτταρα διακεκομμένα με θετικά κατά Gram βακτήρια είναι ορατά σε κολπικό επίχρισμα.

    Μικροσκοπία των περιττωμάτων που έχουν λεκιασθεί με gram, που χρησιμοποιήθηκε ως μελέτη διαλογής. Όταν εντοπίζονται ουδετερόφιλα, αρχίζουν βακτηριολογική έρευνα και ο προσδιορισμός των τοξινών που παράγονται από το Clostridium difficile.

    Η χρώση Gram χρησιμοποιείται επίσης για την ταυτοποίηση βακτηρίων και λευκοκυττάρων στο υγρό υγρό, το αρθρικό, το υπεζωκοτικό και το περιτοναϊκό υγρό. Το κατώτερο όριο ευαισθησίας της μεθόδου είναι 10.000 βακτήρια ανά 1 ml.

    Για να αυξηθεί η ευαισθησία, το δοκιμαστικό υγρό φυγοκεντρείται και παρασκευάζεται ένα χρωματισμένο επίχρισμα επίχρωσης. Αυτή η διαδικασία ονομάζεται υλικό εμπλουτισμού. Είναι απλό και ιδιαίτερα πολύτιμο για την ανίχνευση βακτηρίων και λευκών αιμοσφαιρίων σε CSF και ανθεκτικά στα οξέα βακτηρίδια στα πτυέια.

    Παραπομπές:

    Μέθοδοι γενικής βακτηριολογίας

    Η τεχνική της ζωγραφικής επιχρίσματα. Για τα βαφικά επιχρίσματα χρησιμοποιούνται διαλύματα βαφής ή χαρτί μελάνης, όπως προτείνεται από τον A.I. Μπλε. Η ευκολία παρασκευής, η ευκολία χρήσης, καθώς και η δυνατότητα αποθήκευσης χαρτιού μελάνης για απεριόριστο χρόνο, αποτέλεσαν τη βάση για την ευρεία χρήση τους σε διάφορες μεθόδους χρωματισμού.

    Χαρτί ζωγραφικής χρωμάτων. Μερικές σταγόνες νερού εφαρμόζονται στο αποξηραμένο και σταθερό παρασκεύασμα, τοποθετούνται χρωματιστά χαρτιά μεγέθους 2 × 2 cm. Κατά τη διάρκεια ολόκληρης της περιόδου βαφής, το χαρτί πρέπει να παραμένει υγρό και να κολλάει σφικτά στην επιφάνεια του γυαλιού. Κατά την ξήρανση, το χαρτί επιπλέον υγραίνεται με νερό. Η διάρκεια της χρώσης επίχρωσης προσδιορίζεται με τη μέθοδο χρώσης. Στο τέλος της βαφής, το χαρτί αφαιρείται προσεκτικά με λαβίδες και το επίχρισμα πλένεται με νερό της βρύσης και στεγνώνει στον αέρα ή το διηθητικό χαρτί.

    Κηλίδες επιχρίσματα με διαλύματα βαφής. Η βαφή εφαρμόζεται στο αποξηραμένο και σταθερό παρασκεύασμα με μια πιπέτα σε τέτοια ποσότητα ώστε να καλύπτει ολόκληρο το επίχρισμα. Όταν οι κηλίδες κηλιδώνονται με συμπυκνωμένα διαλύματα χρωμάτων (καρβολική φουκσινη, καρβολική γεντιανή ή κρυσταλλικό ιώδες), χρωματίζονται μέσω διηθητικού χαρτιού που συγκρατεί τα σωματίδια χρωστικής: τοποθετείται μια ταινία διηθητικού χαρτιού σε σταθερό επίχρισμα και το διάλυμα χρωστικής χύνεται πάνω σε αυτό.

    Για μικροσκοπική εξέταση, τα παρασκευασμένα επιχρίσματα, αποξηραμένα και σταθερά, υποβάλλονται σε χρωματισμό. Ο χρωματισμός είναι απλός και πολύπλοκος. Ο απλός χρωματισμός συνίσταται στην εφαρμογή μιας μόνο βαφής σε ένα εγκεφαλικό για μια ορισμένη χρονική περίοδο. Τις περισσότερες φορές, απλή βαφή νερού χρησιμοποιείται αλκοόλ-νερό (1:10) Pfeiffer fuchsin, Leffler μπλε του μεθυλενίου και σαφρανίνη. Η ηωσίνη, ως όξινη βαφή, χρησιμοποιείται μόνο για να κηλιδώνει το κυτταρόπλασμα των κυττάρων και να βάφει το φόντο. Το ξινό πορφυρό είναι εντελώς ακατάλληλο για χρώση βακτηρίων.

    Με απλό χρωματισμό, τα μικροβιακά σώματα αντιλαμβάνονται το χρώμα της βαφής που χρησιμοποιείται τόσο έντονα όσο οι πυρήνες των κυττάρων. Ταυτόχρονα, το κυτταρόπλασμα και ολόκληρο το υπόβαθρο του επιχρίσματος (αν δεν είναι ένα επίχρισμα από μια καθαρή καλλιέργεια) είναι βαμμένα στο ίδιο χρώμα, αλλά κάπως πιο παχύ. Fuchsin και ιώδη γεντιανής είναι πιο έντονα χρώματα? το κυανό του μεθυλενίου κηλιδώνεται πολύ. Η αντίληψη του χρώματος εξαρτάται όχι μόνο από τις ιδιότητες των χρωμάτων, αλλά και από τις ιδιότητες των μικροβίων που πρόκειται να χρωματιστούν. Τα περισσότερα μικρόβια χρωματίζονται εύκολα και γρήγορα με νερό ή υδατοδιαλυτά διαλύματα χρωμάτων.

    Για τα μικροβιακά που προκαλούν βαφή χρώματος (για παράδειγμα, ο αιτιολογικός παράγοντας της φυματίωσης) ή τα μέρη τους (σπόρια, μαστίγια κ.λπ.), πρέπει να εφαρμόζονται πιο εντατικές (αναγκαστικές) μέθοδοι χρώσης.

    Είναι δυνατό να αναγκαστεί ο χρωματισμός: α) με την αύξηση της χρωστικής ικανότητας των βασικών μελανιών, β) με την επιμήκυνση του χρωματισμού και γ) με τη δράση των τουρσιάλων.

    Για να αυξηθεί η ισχύς χρωματισμού, το χρώμα εκτίθεται σε υψηλή θερμοκρασία (θέρμανση) έως ότου εμφανιστεί ατμός (ακόμη και βρασμός). Μεταβάλλοντας τον βαθμό θέρμανσης, είναι δυνατόν να αποκτήσετε διαφορετικούς βαθμούς αντοχής χρώματος.

    Η επιμήκυνση της επίδρασης του διαλύματος χρωματισμού σε ένα αντικείμενο μπορεί επίσης να αυξήσει σε κάποιο βαθμό τον βαθμό χρωματισμού.

    Οι μηχανισμοί δράσης των βακτηρίων είναι διαφορετικοί: σε μερικές περιπτώσεις, τα βακτηρίδια δρουν σε βαφές, σε άλλα, στην ικανότητα των κυττάρων να χρωματίζουν την αντίληψη. Οι φράκτες ενεργούν επί του επιχρίσματος είτε πριν από τη δράση του χρώματος (για παράδειγμα, όταν χρωματίζει το μαστίγιο), είτε μαζί με το χρώμα (φαινόλη στο Tsili fuchsin), ή μετά τη δράση του χρώματος (λύση Lyugolevsky στη μέθοδο Gram).

    Κατά τη βαφή επιχρισμάτων, εκτός από τα χρώματα, χρησιμοποιούνται επίσης λεγόμενες ουσίες λεύκανσης ή χρωματισμού. Τα τελευταία χρησιμεύουν για την απομάκρυνση της περίσσειας του χρώματος από ολόκληρο το μικροβιακό κύτταρο ή από ένα μέρος του όταν το χρώμα είναι υπερβολικά έντονο για την απορρόφηση του υλικού ή για τη βαφή του με τη χρήση θερμότητας κλπ.

    Τα ακόλουθα χρησιμοποιούνται ως λευκαντικά: αλκοόλη, 5% υδατικό διάλυμα θειικού οξέος, 20-30% υδατικό διάλυμα νιτρικού οξέος, 3% διάλυμα υδροχλωρικού οξέος σε απόλυτη αλκοόλη, κλπ.

    Για να βάψετε κηλίδες είναι απαραίτητο να έχετε στην επιφάνεια εργασίας μια σειρά από διαλύματα χρωματισμού σε φιάλες (καλύτερα από πορτοκαλί γυαλί) με πιπέτες και κουτιά από καουτσούκ. Τα φιαλίδια θα πρέπει να φέρουν τις κατάλληλες ονομασίες. Για να αποφύγετε την ταχεία μόλυνση με ετικέτες χρώματος συνιστάται να το απορροφάτε με τηγμένη παραφίνη (χρησιμοποιώντας μια βούρτσα). Τα φιαλίδια των χρωμάτων τοποθετούνται σε ξύλινο τρίποδο (Εικ. 2).

    Το Σχ. 2. Φιάλες για χρώματα

    Για το πλύσιμο των χρωμάτων και των επιφανειών έκπλυσης, απαιτείται μια φιάλη με σωλήνα σε ένα περίπτερο για αποσταγμένο νερό και ένα καλούπι (δοχείο αποστράγγισης) με μια βάση στήριξης για επιχρίσματα. Η βάση γεφυρών αποτελείται από δύο γυάλινους σωλήνες ή ράβδους συνδεδεμένους στα άκρα τους με κομμάτια από ελαστικά σωληνάρια. Το πλάτος της βάσης πρέπει να είναι μικρότερο από το μήκος της ολίσθησης. Επιπλέον, απαιτείται καπνοδόχος αλκοόλης (ή φυσικού αερίου) και τσιμπιδάκι Cornet για μικροσκοπικές αντικειμενοφόρες πλάκες. Όταν ζωγραφίζετε με θέρμανση, η γυάλινη ολίσθηση σφίγγεται με τσιμπιδάκια και διατηρείται για ορισμένο χρονικό διάστημα πάνω από τη φλόγα. Σε περίπτωση παρατεταμένου χρωματισμού, χρησιμοποιούν κυψελίδες ή μικρά κύπελλα, όπου χύνουν το χρώμα και βυθίζονται μέσα του. Όταν ζωγραφίζετε ταυτόχρονα διάφορα κηλίδες στην κυψελίδα, για να αποφύγετε τη συγκόλληση των γυαλιών, αυτά ενώνονται σε δύο με την απωθημένη πλευρά έξω και ενισχυμένα με ελαστικούς δακτυλίους κομμένους από τους σωλήνες. Μετά την χρώση, οι επιχρίσματα πλένονται με νερό και ξηραίνονται πλήρως με διηθητικό χαρτί.

    Το έργο των τελευταίων ετών αποκάλυψε τη δυνατότητα διατήρησης της βιωσιμότητας των μικροβίων, κυρίως των σπορίων, κατά τη διάρκεια της χρώσης. Επομένως, απαιτείται επαρκής στερέωση των κτυπήματος. Το νερό πλύσης (όταν χρωματίζεται) πρέπει να αποστραγγιστεί σε ειδικό δοχείο, ακολουθούμενο από εξουδετέρωση, το χρησιμοποιημένο διηθητικό χαρτί (μετά την ξήρανση των επιχρισμάτων) δεν πρέπει να απορρίπτεται, αλλά καίγεται και τα χρησιμοποιημένα επιχρίσματα πρέπει να απολυμαίνονται.

    Απλές μέθοδοι βαφής επιχρίσματα

    Με μια απλή μέθοδο βαφής, μερικές σταγόνες λίγο αλκοολούχου ή υδατικού διαλύματος χρώματος χύνεται σε σταθερό επίχρισμα για 1-2 λεπτά. Το Fuchsin (1:10) ή το κυανό του μεθυλενίου Leffler χρησιμοποιείται συχνότερα για το σκοπό αυτό. Στη συνέχεια, η βαφή ξεπλένεται με αποσταγμένο νερό και το επίχρισμα ξηραίνεται μεταξύ δύο λωρίδων χαρτιού διηθήσεως. Συνήθως το fuchsin (1:10) χρώμα 10-30 δευτερόλεπτα και το κυανό του μεθυλενίου 2-10 λεπτά. Το Fuchsin βαφίζει τα επιχρίσματα πιο έντονα και όταν χρωματίζεται με κυανό του μεθυλενίου, επιτυγχάνονται απαλά, πιο κομψά παρασκευάσματα. Το επίχρισμα μετά από ξήρανση με το διηθητικό χαρτί πρέπει να είναι εντελώς στεγνό, διαφορετικά εάν η παραμένουσα υγρασία έλθει σε επαφή με το έλαιο κέδρου, σχηματίζεται ένα γαλάκτωμα και η μικροσκοπία θα έχει ως αποτέλεσμα μια σκοτεινή εικόνα. Γενικά, η διάρκεια της χρώσης εξαρτάται από τον τύπο και την ποιότητα του διαλύματος χρώσης, τον βαθμό επιδεκτικότητας του μικροβίου από τη χρώση και το πάχος του επιχρίσματος.

    Χρωματισμός από τον Muromtsev

    Προετοιμάστε δύο λύσεις:

    Καρβαλικό οξύ (κρυσταλλικό)

    Αφού διαλύεται η βαφή, τα δύο διαλύματα αναμιγνύονται και φιλτράρονται μέσω ενός χαρτιού. Η βαφή διατηρείται για μεγάλο χρονικό διάστημα. Τα βερνίκια ζωγραφίζονται μέσω ταινιών φίλτρου για 15 έως 30 δευτερόλεπτα.

    Προσδιορίζοντας τα επιχρίσματα, ο συγγραφέας συνιστά να παράγει μίγμα αλκοόλης (80 μέρη) με φορμαλίνη (20 μέρη) για 3-10 λεπτά.

    Με αυτή τη βαφή επιχρισμάτων σε μικροβιακά κύτταρα, ανιχνεύονται εγκλείσματα, διπολικότητα, κάψουλες και σπόρια. Η μέθοδος είναι κατάλληλη για χρώση επιχρισμάτων από όργανα, αίμα, καλλιέργειες επί μέσου με φυσική πρωτεΐνη και σε ημι-υγρό άγαρ.

    Το φόντο του φαρμάκου από αυτά τα υποστρώματα είναι ροζ. τα κύτταρα των ιστών και τα μικροβιακά σώματα βαμμένα σε μπλε-μπλε χρώμα.

    Δύσκολες (διαφορικές) μέθοδοι χρώσης επίχρωσης

    Οι πολύπλοκες μέθοδοι χρώσης βασίζονται στα χαρακτηριστικά της φυσικοχημικής δομής του μικροβιακού κυττάρου. Η ουσία αυτών των μεθόδων έγκειται στην επίδραση επί του επιχρίσματος δύο βαφών, εκ των οποίων το κύριο (κύριο) χρώμα, και το άλλο - επιπλέον (αντίθεση). Μετά την έκθεση στην πρώτη βαφή, το επίχρισμα αποχρωματίζεται και μόνο μετά από αυτό υποβάλλεται σε επιπρόσθετο χρωματισμό. Ορισμένα χημικά αντιδραστήρια (οξέα, αλκάλια, αλκοόλη, ακετόνη κλπ.) Μπορούν να χρησιμοποιηθούν ως λευκαντικά. Το πλύσιμο του επιχρίσματος με απλό νερό είναι επίσης μια καθαρά μηχανική διαδικασία λεύκανσης, αλλά αυτό απαιτεί μεγάλο χρονικό διάστημα. Επιπλέον, ο αποχρωματισμός είναι ελλιπής. Σε σχέση με τις λεύκανες ουσίες, τα μικρόβια μπορούν να χωριστούν σε ομάδες εύκολα και δύσκολα να λευκανθούν. Δεν είναι όλα τα είδη μικροβίων εξίσου σχετικά με τους λευκαντικούς παράγοντες. μερικά είναι ανθεκτικά σε οξέα και αλκοόλ, άλλα είναι μόνο ανθεκτικά στα οξέα. Τέλος, μερικοί, για παράδειγμα, σπόρια, αντιστέκονται δυναμικά στις επιδράσεις όλων των λευκαντικών παραγόντων και ανήκουν στην ομάδα ανθεκτικών στη βαφή.

    Οι σύνθετες μέθοδοι χρώσης έχουν σημαντική διαφορική διαγνωστική αξία για τον χαρακτηρισμό του εξεταζόμενου μικροβίου.

    Γκρίζο χρώμα

    Κατά την επεξεργασία επιχρισμάτων (τεμαχίων) από όργανα και ιστούς που περιέχουν μικροοργανισμούς, βιολέτα γεντιανής, και στη συνέχεια ιώδιο, το παρασκεύασμα, βαμμένο με μαύρο χρώμα, έχει την ιδιότητα του λεύκανσης υπό τη δράση του αλκοόλ. Ταυτόχρονα, μερικά από τα βακτηρίδια που περιέχονται στο επίχρισμα επίσης αποχρωματίζονται, ενώ άλλα μετατρέπονται σε μοβ. Με επιπρόσθετο χρωματισμό (ιδιαίτερα με το Fuchsin της Pfeiffer), τα βακτήρια που αποχρωματίζονται με το αλκοόλ είναι χρωματισμένα κόκκινα (gram-αρνητικά). Άλλοι που διατηρούν σταθερά το ιώδες χρώμα (ιώδιο + ιώδες γεντιανής), που δεν λευκώνονται με αλκοόλ, ανήκουν στην ομάδα των θετικών κατά Gram βακτηρίων. Η διαφορά μεταξύ των θετικών κατά Gram και των αρνητικών κατά gram βακτηρίων εξαρτάται από τη διαφορά στα ισοηλεκτρικά τους σημεία και η ικανότητα των θετικών κατά Gram βακτηριδίων να διατηρούν το χρώμα συνδέεται με την παρουσία του άλατος μαγνησίου του ριβονουκλεϊκού οξέος, το οποίο δεν περιέχουν αρνητικά κατά Gram βακτηρίδια. Το καλύτερο από όλα, η κηλίδωση Gram επιτυγχάνεται μετά την επίθεση των επιχρισμάτων με μια φυσική μέθοδο (θέρμανση). Τα χαρακτηριστικά της στάσης ορισμένων τύπων βακτηριδίων σε διαφορετικά χρώματα, και συγκεκριμένα στο χρωματισμό με τη μέθοδο Gram, χαρακτηρίζονται από τις λεγόμενες ιδιότητες του μικροβέστου.

    Τεχνική χρωματισμού. Ένα επίχρισμα διηθητικού χαρτιού ελαφρώς μικρότερου μεγέθους και ενός αντικειμενοφόρου τοποθετείται σε ένα επίχρισμα στερεωμένο με θερμότητα, και χύνεται επάνω του επαρκής ποσότητα ιώδους διαλύματος κρυσταλλικού, καρβολικού ή ανιλίνης γεντιανής ή κάποιο άλλο ιώδες χρώμα τριφαινυλομεθανίου για παράδειγμα 1-2 λεπτά. Κατόπιν απομακρύνεται το χρώμα, απομακρύνεται μια λωρίδα από διηθητικό χαρτί και, χωρίς πλύση με νερό, το διάλυμα Lugol χύνεται επί του επιχρίσματος για 1-2 λεπτά. Το διάλυμα στραγγίζεται και αποχρωματίζει το φάρμακο σε αλκοόλη 96 ° για 30-60 δευτερόλεπτα, πλένεται με νερό και χρωματίζεται με Fuchsin της Pfeiffer (ή αραιώνεται με σαφρανίνη, neutralula ή vesuvine) για 2-3 λεπτά. Στη συνέχεια το χρώμα ξεπλένεται με νερό και το επίχρισμα ξηραίνεται με ένα καθαρό χαρτί φίλτρου.

    Μικροσκοπική εικόνα: Εάν τα επιχρίσματα Gram είναι σωστά χρωματισμένα, τα gram-θετικά μικρόβια θα είναι έγχρωμα σκούρα πορφυρά και τα αρνητικά κατά gram χρώματα θα χρωματιστούν ως πρόσθετη βαφή (για παράδειγμα, το ροζ χρώμα της Fuchsin fuchsin από Pfeiffer).

    Μην χρησιμοποιείτε μολυσμένο διηθητικό χαρτί: είναι δυνατή η μηχανική μεταφορά μικροβίων από το ένα επίχρισμα στο άλλο, γεγονός που μπορεί να επηρεάσει τα αποτελέσματα της μικροσκοπίας. Η διάρκεια έκθεσης σε βαφή, το διάλυμα Lugol (βαμβάκι) και το αλκοόλ εξαρτάται από το πάχος του επιχρίσματος. Ιδιαίτερα το κρίσιμο σημείο της κηλίδας κατά Gram είναι ο αποχρωματισμός του επιχρίσματος με το αλκοόλ. Με σύντομη έκθεση στο αλκοόλ, τα παρασκευάσματα ξαναβαθμίζονται και με παρατεταμένη έκθεση όλα τα μικρόβια (συμπεριλαμβανομένου του p-θετικού) θα αποχρωματίζονται. Σε ένα παχύ, χοντρό επίχρισμα (για παράδειγμα, από μια καλλιέργεια άγαρ) ο χρόνος έκθεσης σε αλκοόλ πρέπει να είναι μεγαλύτερος από ένα λεπτό επίχρισμα, ειδικά από υγρές καλλιέργειες. Όταν εκτίθενται σε αλκοόλ σε ένα άνισα προετοιμασμένο επίχρισμα στα παχιά μέρη του, τα μικρόβια παρέμειναν χωρίς αποχρωματισμό και σε λεπτά αυτά θα αποχρωματίσουν. παίρνετε ένα "τρελό" χρωματικό μοτίβο, το οποίο μπορεί να οδηγήσει σε λανθασμένα συμπεράσματα.

    Μερικές φορές τα αρνητικά κατά gram βακτηρίδια μπορούν να παρατηρηθούν στην καλλιέργεια των θετικών κατά gram βακτηρίων, η οποία είναι η μεγαλύτερη, όσο μεγαλύτερη είναι η ηλικία του πληθυσμού. Αυτό δεν είναι τίποτα περισσότερο από τα βακτηριακά πτώματα που έχουν υποβληθεί σε ενδοκυτταρική αυτόλυση, ως αποτέλεσμα του οποίου το κύτταρο έχει χάσει τα ριβονουκλεϊνικά μαγνησίου. Από την άλλη πλευρά, σε πολύ μικρές καλλιέργειες (αρκετές ώρες ανάπτυξης) της οικογένειας των εντεροβακτηρίων, οι γιγαντιαίες, νεανικές μορφές των βακτηρίων αυτών, οι οποίες είναι 2-3 φορές μεγαλύτερες από τους ενήλικες (18ωρες), είναι πολύ βασεόφιλες λόγω του υπερβολικού φορτίου των κυτταροπλασμάτων τους με ριβονουκλεϊνικά άλατα. Επομένως, όταν χρωματίζονται από το Gram, χρωματίζονται με ματζέντα τόσο έντονα ώστε, σε φτωχό φως, μπορούν να ληφθούν ως θετικές κατά Gram φυτικές μορφές σποριδικών ραβδιών.

    Για αρχάριους, καθώς και σε αμφίβολη περίπτωση, συνιστάται η προετοιμασία παρασκευασμάτων ελέγχου στο ίδιο γυαλί όπου βρίσκεται το δοκιμαστικό επίχρισμα - ένα από μια καλλιέργεια μικροβίων, προφανώς γραμμο-θετικό και το άλλο από αρνητικά κατά gram.

    Όταν ο αποχρωματισμός του φαρμάκου σε γραμμομοριακό αλκοόλ μπορεί να χυθεί απευθείας στο επίχρισμα, ανακινώντας συνεχώς το ποτήρι. Είναι καλύτερο να πραγματοποιηθεί ο αποχρωματισμός στις κυψελίδες όπου χύνεται αλκοόλ και, λαμβάνοντας τα τσιμπιδάκια του Cornet, το φάρμακο σηκώνεται και χαμηλώνει παρατηρώντας το χρώμα του αλκοόλ που ρέει από το γυαλί. Ο αποχρωματισμός θεωρείται πλήρης όταν οι σταγόνες αλκοόλης που ρέουν από το επίχρισμα γίνονται ίσες ως προς το αλκοόλ στην κυψελίδα. συνήθως διαρκεί 10-30 δευτερόλεπτα, ανάλογα με το πάχος της διαδρομής.

    Το αλκοόλ 96 ° σε κυψελίδες πρέπει να αντικαθίσταται συχνότερα (το 80 ° αλκοόλ δεν διαφοροποιεί σωστά το επίχρισμα). Το χρησιμοποιημένο αλκοόλ συνήθως χύνεται από τις κυψελίδες σε καυστήρες αλκοόλης.

    Για αρχάριους, μπορεί να συνιστάται ο αποχρωματισμός των επιχρισμάτων με ιωδιούχο αλκοόλ. Έχει διαπιστωθεί ότι αν προστεθεί στο υγρό αποχρωματισμού ένα μικρό βάμμα ιωδίου, τότε τα μικρόβια, τα οποία χρωματίζονται κατά gram-θετικό τρόπο, δεν αποχρωματίζονται σε ένα τέτοιο υγρό ακόμη και επί μία ώρα και τα αρνητικά κατά gram είναι χρωματισμένα σε περίπου 5 δευτερόλεπτα. Σύμφωνα με τον Savateev, αρκεί να προστεθούν 2-4 ml βάμματος ιωδίου 10% ανά 100 ml αλκοόλης 95 °. η λύση μπορεί να παραμείνει για μεγάλο χρονικό διάστημα. Εάν χρησιμοποιείται ακετόνη αντί αλκοόλης, προστίθεται βάμμα ιωδίου πριν από τη χρήση.

    Δύο λεπτά είναι αρκετοί για αποχρωματισμό των επιχρισμάτων με ιωδιούχο αλκοόλ, ακολουθούμενο από πλύσιμο με νερό και επιπλέον χρωματισμό Pfeiffer-fuchsin.

    Τροποποίηση της μεθόδου χρώματος του Gram

    Όπως αναφέρθηκε παραπάνω, η βαφή Gram είναι η πιο σημαντική μέθοδος για την αναγνώριση των βακτηριδίων. Είναι θεωρητικά δυνατό να διαιρέσουμε τα βακτηρίδια σε δύο ομάδες: θετικές κατά gram και αρνητικές κατά gram. στην πραγματικότητα, υπάρχουν περιπτώσεις όπου τα ίδια βακτήρια χαρακτηρίζονται ως "gram-selectable". Δεδομένου ότι η μέθοδος αναπτύχθηκε για πρώτη φορά από τον Christian Gram το 1884, έχουν δημοσιευθεί πολυάριθμες τροποποιήσεις χρώματος Gram. Ένα επίχρισμα βακτηρίων για χρώση σε υαλοπίνακα επιτυγχάνεται με μία άμεση μέθοδο από μια καλλιέργεια σε ένα υγρό ή στερεό μέσο, ​​αλλά είναι καλύτερο να παρασκευαστεί από ένα δείγμα σταθεροποιημένο με φορμαλίνη, πλυμένο. Λίγα επιπλέον λεπτά που δαπανώνται για την αναστολή των βακτηρίων σε 5% (ο / ο) φορμαλίνη, τη συλλογή και πλύση τους με φυγοκέντρηση, πληρώνουν επειδή το μέγεθος και το σχήμα κυττάρων διατηρούνται καλά, τα κύτταρα χρωματίζονται ομοιόμορφα και τα τυχαία διασκορπισμένα ιζήματα από τα μέσα υγρής καλλιέργειας απουσιάζουν. Σε κάθε περίπτωση, συνιστάται να στεγνώσει το επίχρισμα στον αέρα και να το στερεώσει με θέρμανση, όπως για μια απλή βαφή. Είναι σημαντική η τυποποίηση της μεθόδου χρώσης gram. Παρόμοια αποτελέσματα δίνουν δύο ακόμη μεθόδους χρωματισμού - στην τροποποίηση του Hooker και στην τροποποίηση του Burke.

    Gram χρωματισμό σε μια τροποποίηση του Hooker.

    Διάλυμα Α για την παρασκευή του αντιδραστηρίου χρωματισμού:

    Κρύσταλλο ιώδες (με περιεκτικότητα σε ξηρή ουσία 90%)

    Αιθανόλη 95% (ο / ο)

    Διάλυμα Β για την παρασκευή του αντιδραστηρίου χρωματισμού:

    Τα διαλύματα Α και Β αναμειγνύονται για να ληφθεί αντιδραστήριο χρώματος κρυσταλλικού ιώδους. Αφήστε για 24 ώρες και πριν χρησιμοποιήσετε το φίλτρο μέσω του φίλτρου χαρτιού.

    Το ιώδιο και το ιωδιούχο κάλιο θρυμματίζονται σε κονίαμα και προστίθεται αργά νερό με συνεχή άλεση, μέχρις ότου διαλύεται το ιώδιο. Φυλάσσετε σε σκοτεινή φιάλη.

    Διαλύτης για λεύκανση:

    Αιθανόλη 95% (ο / ο)

    Σαφρανίνη Ο [2.5% (β / ο) 95% (ο / ο) αιθανόλη]

    Ένα αποξηραμένο στον αέρα βακτηριακό επίχρισμα που έχει αποχρωματισθεί σε θερμότητα εμβαπτίζεται επί 1 λεπτό σε ένα διάλυμα κηλίδωσης κρυσταλλικού ιώδους.

    Το επίχρισμα πλένεται σε ένα αδύναμο, γωνιακό πίδακα νερού βρύσης για 2 δευτερόλεπτα.

    Το επίχρισμα τοποθετείται σε ιωδίδιο για 1 λεπτό.

    Πλένεται σε ένα αδύναμο, που τρέχει σε γωνιακό ρεύμα νερού βρύσης για 2 δευτερόλεπτα, μετά το οποίο στεγνώνει με χαρτί που χτυπάει.

    Βυθίστε το επίχρισμα επί 30 δευτερόλεπτα σε 95% αιθανόλη, ανακινώντας το τελευταίο, μετά το οποίο το επίχρισμα ξηραίνεται με χαρτί που χρωματίζει.

    Βυθίστε το επίχρισμα επί 10 δευτερόλεπτα σε πρόσθετη βαφή.

    Το επίχρισμα πλένεται με ένα αδύναμο, γωνιακό πίδακα νερού βρύσης έως ότου εξαφανιστεί το χρώμα στην αποστράγγιση, μετά από το οποίο ξηραίνεται με χαρτί που χτυπά.

    Gram λεκές στην τροποποίηση Burke.

    Κρύσταλλο ιώδες (με περιεκτικότητα σε ξηρή ουσία 90%)

    Το Mordant παρασκευάστηκε με τον ίδιο τρόπο όπως για την τροποποίηση του Hooker.

    Διαλύτης για αποχρωματισμό: (προσοχή, εύφλεκτο!)

    Safranin O (με περιεκτικότητα σε ξηρή ουσία 85%)

    Το επίχρισμα, ξηραμένο στον αέρα και σταθεροποιημένο με θέρμανση, βυθίζεται στο διάλυμα Α, προστίθενται 2-3 σταγόνες διαλύματος Β και επωάζονται για 2 λεπτά.

    Πλύνετε το επίχρισμα με ιωδίδιο και στη συνέχεια το καλύψτε για 2 λεπτά με ένα φρέσκο ​​βακκίνισμα.

    Το μάκτρο πλένεται σε ένα αδύναμο, γωνιακό ρεύμα νερού από τη βρύση για 2 δευτερόλεπτα. Η επιφάνεια γύρω από το επίχρισμα στεγνώνεται με χαρτί με στύπωμα, αλλά το ίδιο το επίχρισμα προστατεύεται από το στέγνωμα.

    Ένας διαλύτης αποχρωματισμού εφαρμόζεται στάγδην σε ένα επίχρισμα με μια κεκλιμένη γυάλινη ολίσθηση μέχρις ότου το χρώμα εξαφανιστεί από τον διαλύτη που ρέει από το γυαλί. Μετά από αυτό, το επίχρισμα ξηραίνεται στον αέρα.

    Η μέθοδος Gram είναι αυτή. Ποια είναι η μέθοδος Gram;

    Η μέθοδος Gram είναι μια μέθοδος χρώσης μικροοργανισμών για έρευνα που επιτρέπει τη διαφοροποίηση των βακτηρίων σύμφωνα με τις βιοχημικές ιδιότητες του κυτταρικού τους τοιχώματος. Προτάθηκε το 1884 από τον δανικό γιατρό Γ. Κ. Gram.

    Βακτήρια Gram βαμμένα με χρωστικές ανιλίνης - γεντιανές ή ιώδες μεθύλ, κλπ., Τότε η βαφή σταθεροποιείται με ένα διάλυμα ιωδίου. Κατά τη διάρκεια της επακόλουθης πλύσης του χρωματισμένου φαρμάκου με αλκοόλη, αυτοί οι τύποι βακτηριδίων που είναι σταθερά χρωματισμένα ονομάζονται gram-θετικά βακτήρια (δηλ. Gram (+)), αντίθετα με gram-αρνητικά βακτήρια (Gram (-)) που αποχρωματίζονται όταν πλένονται.

    Χρήση στη διάγνωση

    Η χρώση Gram έχει μεγάλη σημασία στη συστηματική βακτηρίδια, καθώς και στη μικροβιολογική διάγνωση μολυσματικών ασθενειών.

    Οι θετικοί κατά Gram cocci (εκτός από τους εκπροσώπους του γένους Neisseria) και οι σπογγώδεις μορφές των βακτηριδίων, καθώς και η ζύμη, είναι βαμμένα σε ένα μπλε-μαύρο (σκούρο μπλε) χρώμα.

    Πολλά νεφελώδη βακτήρια είναι gram-αρνητικά, γίνονται κόκκινα, οι πυρήνες κυττάρων γίνονται έντονα κόκκινα και το κυτταρόπλασμα είναι ροζ ή πορφυρό.

    Τεχνική χρωματισμού

    Η βαφή Gram αναφέρεται σε μια σύνθετη μέθοδο χρώσης όταν ένα επίχρισμα επηρεάζεται από δύο χρωστικές ουσίες, μία από τις οποίες είναι η κύρια και η άλλη είναι επιπρόσθετη. Εκτός από τις βαφές, χρησιμοποιούνται λευκαντικές ουσίες για πολύπλοκες μεθόδους χρώσης: αλκοόλ, οξέα, κλπ.

    Οι χρώσεις Gram συχνά χρησιμοποιούν χρωστικές ανιλίνης της ομάδας τριφαινυλμεθανίου: γεντιανή, μεθυλ ιώδη ή κρυσταλλικό ιώδες. Gram-θετικοί Gram (+) μικροοργανισμοί δίνουν μια ισχυρή σύνδεση με αυτές τις χρωστικές και το ιώδιο. Ταυτόχρονα, δεν αποχρωματίζονται όταν εκτίθενται σε αλκοόλη, με αποτέλεσμα, με επιπλέον χρώση με το Fuchsin Gram (+), οι μικροοργανισμοί να μην αλλάζουν το αρχικά υιοθετημένο πορφυρό χρώμα.

    Gram-αρνητικοί Gram (-) μικροοργανισμοί σχηματίζουν μια ένωση με βασικές χρωστικές και ιώδιο που καταστρέφεται εύκολα από τη δράση του αλκοόλ. Ως αποτέλεσμα, τα μικρόβια αποχρωματίζονται και στη συνέχεια χρωματίζονται με ματζέντα, αποκτώντας ένα κόκκινο χρώμα.

    Προετοιμασία υλικού για τη ζωγραφική

    Το δοκιμαστικό υλικό απλώνεται σε ένα λεπτό στρώμα πάνω από την επιφάνεια μιας καλά απολιπανθείσας ολίσθησης. Το παρασκευασμένο επίχρισμα ξηραίνεται στον αέρα και σταθεροποιείται μετά από πλήρη ξήρανση. Τα ιστολογικά τμήματα παρασκευάζονται με μια τεχνική ρουτίνας, καθορίζοντας τεμάχια ιστού σε φορμαλίνη και χύνοντας σε παραφίνη.

    Καθορισμός

    Κατά την στερέωση, το επίχρισμα στερεώνεται στην επιφάνεια της ολίσθησης και επομένως τα μικροβιακά κύτταρα δεν ξεπλένονται κατά την διάρκεια της επακόλουθης χρώσης του παρασκευάσματος. Επιπλέον, τα νεκρά μικροβιακά κύτταρα κηλιδώνονται καλύτερα από τα ζωντανά κύτταρα.

    Υπάρχει μια φυσική μέθοδος στερέωσης, η οποία βασίζεται στην επίδραση της υψηλής θερμοκρασίας στο μικροβιακό κύτταρο και σε χημικές μεθόδους που περιλαμβάνουν τη χρήση χημικών ουσιών που προκαλούν πήξη κυτταροπλασματικών πρωτεϊνών.

    Μέθοδος φυσικής σταθεροποίησης

    Μια γυάλινη ολίσθηση με ένα παρασκεύασμα λαμβάνεται με τσιμπιδάκια ή δάκτυλα I και II του δεξιού χεριού από τις άκρες με μια βούρτσα προς τα πάνω και με μια ομαλή κίνηση εκτελούνται 2-3 φορές πάνω από το πάνω μέρος της φλόγας του καυστήρα. Η όλη διαδικασία στερέωσης θα πρέπει να διαρκέσει όχι περισσότερο από 2 δευτερόλεπτα.

    Η αξιοπιστία της στερέωσης ελέγχεται με την ακόλουθη μέθοδο: η επιφάνεια χωρίς λεκέδες του ολισθητήρα εφαρμόζεται στην πίσω επιφάνεια του αριστερού χεριού. Αν το επίχρισμα είναι σωστά στερεωμένο, το γυαλί πρέπει να είναι ζεστό, αλλά να μην προκαλεί αίσθηση καψίματος (70-80 ° C).

    Χημική μέθοδος στερέωσης

    Για τον καθορισμό του στυλεό χρησιμοποιείται μεθυλική αλκοόλη, ακετόνη, ένα μίγμα Nikiforov (μίγμα αιθανόλης 96% και αναισθητικού αιθέρα σε αναλογία 1: 1), Carnoy του ρευστού (αιθυλική αλκοόλη 96% - 60% χλωροφόρμιο, 30% παγόμορφο οξικό οξύ 10%), αλκοόλη (40% φορμαλίνη 5 ml, αιθυλική αλκοόλη 96-95 ml). Μια γυάλινη αντικειμενοφόρος πλάκα με ξηρό επίχρισμα βυθίζεται σε μια φιάλη με σταθεροποιητική ουσία για 10-15 λεπτά και στη συνέχεια ξηραίνεται στον αέρα. Η σταθεροποίηση σε ζεύγη 40% φορμαλίνης για μερικά δευτερόλεπτα χρησιμοποιείται επίσης.

    Διαδικασία χρώσης με σμάλτο

    1. Σε σταθερό επίχρισμα, ρίξτε μία από τις βασικές βαφές για 2-3 λεπτά. Για να αποφευχθεί η καθίζηση, χρωματίζεται με το διηθητικό χαρτί.
    2. Αποστραγγίστε τη βαφή, αφαιρέστε απαλά το χαρτί φίλτρου. Ένα επίχρισμα χύνεται με ένα διάλυμα Lugol ή ένα διάλυμα ιωδιδίου σύμφωνα με το Gram (ένα υδατικό διάλυμα ιωδιούχου καλίου και κρυσταλλικού ιωδίου σε αναλογία 2: 1) για 1-2 λεπτά μέχρις ότου το παρασκεύασμα μαυρίσει.
    3. Το διάλυμα στραγγίζεται, το ξέβγαλμα ξεπλένεται με 96 ° αιθυλική αλκοόλη ή ακετόνη, χύνεται και αποστραγγίζεται μέχρις ότου αποχρωματιστεί το επίχρισμα και το υγρό αποστράγγισης είναι διαυγές (περίπου 20-40-60 δευτερόλεπτα).
    4. Πλύνετε προσεκτικά το ποτήρι σε τρεχούμενο ή απεσταγμένο νερό για 1-2 λεπτά.
    5. Για να προσδιοριστεί η αρνητική κατά gram ομάδα βακτηρίων, τα παρασκευάσματα χρωματίζονται επιπρόσθετα με φουξίνη ή σαφρανίνη (2-5 λεπτά).
    6. Πλένονται σε τρεχούμενο νερό και αποξηραίνονται με διηθητικό χαρτί.

    Τεχνική χρώση βακτηρίων σε ιστολογικές ενότητες Gram-Weigert

    1. Τα αποκερωμένα τμήματα ρυθμίζονται σε νερό.
    2. Αποχρωματίστε 20 λεπτά σε 1% διάλυμα παραρωσανιλίνης ή βασικής φουξίνης σε 1% οξικό οξύ (το διάλυμα χρωστικής θερμαίνεται μέχρι βρασμού, ψύχεται και διηθείται).
    3. Πλένονται σε 3 μετατοπίσεις αποσταγμένου νερού.
    4. Βάλτε 5 λεπτά σε 1% κρυσταλλικό ιώδες σε απεσταγμένο νερό.
    5. Ξεπλύνετε γρήγορα σε 1% διάλυμα χλωριούχου νατρίου.
    6. Επεξεργασμένο για 30 δευτερόλεπτα σε ένα μείγμα: 1 μέρος ιωδίου + 2 μέρη ιωδιούχου καλίου + 100 μέρη απεσταγμένου νερού.
    7. Κηλίδα με χαρτί φίλτρου.
    8. Διαφοροποιήστε, εφαρμόζοντας στο τμήμα ένα μείγμα ίσων όγκων ανιλίνης και ξυλολίου (1 - 2 ml). οι λύσεις αποστραγγίζονται μέχρις ότου τα σύννεφα βαφής σταματήσουν να απομακρύνονται από τη φέτα.
    9. Διεξάγεται μετά από 3 αλλαγές ξυλόλης.
    10. Κλεισμένο σε βάλσαμο ή οποιαδήποτε ρητίνη διαλύεται σε ξυλόλιο.

    Αποτέλεσμα: Τα θετικά κατά Gram βακτήρια είναι μπλε-μαύρο, ιώδες ινώδες, οι πυρήνες είναι κόκκινοι.

    Δείτε επίσης

    • Μικροοργανισμοί χρωματισμού
    • Χρώματα ανιλίνης

    Σύνδεσμοι

    Στη γερμανική γλώσσα

    • Gram HC (1884). "Απομόνωσε το Färbung der Schizomyceten στο Schnitt- und Trockenpräparaten". Fortschritte der Medizin 2: 185-89.

    Στα αγγλικά

    Μέθοδοι μικροβιολογικής έρευνας

    Σκοπός της μικροβιολογικής έρευνας είναι να καθοριστεί ο αιτιολογικός ρόλος ορισμένων μικροοργανισμών σε περίπτωση ασθένειας ή κλινικού συνδρόμου. Θα πρέπει να ληφθεί υπόψη ότι οι αιτιολογικοί παράγοντες της φλεγμονής του αναπαραγωγικού συστήματος μπορεί να είναι τόσο UPM - εκπροσώπους της μεταβατικής συνιστώσας της φυσιολογική μικροχλωρίδα του κόλπου, και άλλα ενδιαιτήματα, καθώς και απόλυτη παθογόνα - παθογόνα των σεξουαλικά μεταδιδόμενων νοσημάτων. Μια τέτοια σύνδεση μεταξύ των ΣΜΝ και των ευκαιριακών λοιμώξεων (που προκαλούνται από την DMP) καθορίζει την ανάγκη μιας ολοκληρωμένης προσέγγισης για τη μικροβιολογική διάγνωση.

    ΕΝΔΕΙΞΕΙΣ

    Μέθοδοι μικροβιολογικής έρευνας χρησιμοποιούνται για την επιβεβαίωση ή την εξαίρεση ασθενειών μολυσματικού χαρακτήρα.

    ΜΕΘΟΔΟΣ

    ΚΑΝΟΝΕΣ ΛΗΨΗΣ ΚΛΙΝΙΚΟΥ ΥΛΙΚΟΥ

    Η απόρριψη από την ουρήθρα λαμβάνεται με πλαστικό μίας χρήσης αποστειρωμένο βακτηριολογικό βρόχο με όγκο 1 μl ή με λεπτό μάκτρο dacron σε σύρμα αλουμινίου. Το προ-εξωτερικό άνοιγμα της ουρήθρας πρέπει να καθαρίζεται με γάζα ή βαμβάκι. Ελλείψει ορατών εκκρίσεων, ο γιατρός μπορεί να κάνει ένα ελαφρύ μασάζ της ουρήθρας. Το ταμπόν / βρόγχος εισάγεται στην ουρήθρα κατά 1-2 cm και αφαιρείται με ελαφρά πίεση του πλευρικού και του οπίσθιου τοιχώματος. Για τις μελέτες μικροσκοπικής και ανοσοφθορισμού, το υλικό μεταφέρεται σε γυάλινη ολίσθηση με κύλιση ενός ταμπόν ή μετακίνηση ενός βρόχου με ένα ελαφρύ υλικό πίεσης επάνω του. Για καλλιέργεια και PCR, το υλικό τοποθετείται σε σωληνάρια με κατάλληλα μέσα μεταφοράς.

    Εξωτερικά γεννητικά όργανα, την παραμονή του κόλπου: επιχρίσματα που λαμβάνονται με αποστειρωμένα βαμβακερά (Dacron) ταμπόν από παθολογικά τροποποιημένες περιοχές. για τη φλεγμονή του μεγάλου αδένα του προθαλάμου, γίνεται διάτρηση · όταν ανοίξει το απόστημα, οι αδένες παίρνουν πύον με αποστειρωμένο βαμβακερό μάκτρο.

    Ο κόλπος: μετά την εισαγωγή του καθρέφτη και του ανελκυστήρα, η εκκένωση λαμβάνεται με αποστειρωμένο βαμβακερό μάκτρο από το οπίσθιο μυρμήγκι ή από παθολογικά τροποποιημένα τμήματα της βλεννογόνου μεμβράνης. για τον σκοπό της καλλιέργειας, το στέλεχος τοποθετείται σε στείρο σωλήνα και αποστέλλεται αμέσως στο εργαστήριο. Εάν αυτή η απαίτηση δεν είναι δυνατόν να εκπληρωθεί, το ληφθέν δείγμα τοποθετείται σε δοκιμαστικό σωλήνα με μέσο μεταφοράς.

    Για το σκοπό της μικροσκοπίας, το ληφθέν δείγμα μεταφέρεται σε γυάλινη ολίσθηση, κυλίζοντας το ταμπόν σε όλες τις πλευρές του γυαλιού, προσπαθώντας να κατανείμει το υλικό ομοιόμορφα, διατηρώντας τη φυσική παρεμβολή όλων των συστατικών της βιοκεννότητας. το επίχρισμα ξηραίνεται στον αέρα, σταθεροποιείται με διάλυμα 96% αιθανόλης (2-3 σταγόνες ανά τεμάχιο έως πλήρη εξάτμιση), επισημασμένο γυαλί και σε κλειστό δοχείο που αποστέλλεται στο εργαστήριο. Κατά τη διάρκεια της καλλιεργητικής διάγνωσης της τριχονομίας, η ληφθείσα εκκένωση τοποθετείται αμέσως σε θρεπτικό μέσο και μεταφέρεται στο εργαστήριο.

    Cervix: μετά την έκθεση του τραχήλου κολπική μητροσκόπιο μέρος αυτού υποβλήθηκε σε επεξεργασία προσεκτικά με μια μπατονέτα εμποτισμένο με στείρο 0,9% χλωριούχο νάτριο ή νερό νάτριο, στη συνέχεια, ένα πρότυπο μπατονέτα εγχέεται απαλά μέσα στο τραχηλικό κανάλι, λαμβάνοντας την απαλλαγή, το στυλεό λαμβάνεται έξω χωρίς επαφή με τα τοιχώματα του κόλπου, και τοποθετήστε το σε δοκιμαστικό σωλήνα με μέσο μεταφοράς για καλλιέργεια. Για τη διεξαγωγή μικροσκοπίας με μέθοδο ανοσοφθορισμού σε διάφορες τροποποιήσεις, ιολογική έρευνα ή PCR, το υλικό λαμβάνεται με ένα ειδικό πινέλο, το οποίο εισάγεται στο κανάλι μετά την αφαίρεση του βλεννογόνου ή τη λήψη δείγματος για καλλιέργεια. Αφού τοποθετηθεί η βούρτσα ταμπόν στον αυχενικό σωλήνα, περιστρέφεται αρκετές φορές κατά 1-2 εκατοστά για να επιτευχθεί κυτταρική απόξεση, αποφεύγοντας όμως τη διάσπαση και τα στοιχεία αίματος στο ταμπόν. Το παραληφθέν υλικό τοποθετείται σε δοκιμαστικούς σωλήνες με κατάλληλο μέσο μεταφοράς. Για τις μελέτες μικροσκοπικής και ανοσοφθορισμού, το ληφθέν δείγμα μεταφέρεται αμέσως από το στυλεό σε γυάλινη ολίσθηση.

    Μήτρα: υλικό από τη μήτρα για έρευνα μπορεί να ληφθεί μόνο με τη χρήση ειδικής συσκευής με εξωτερική επικάλυψη στον αναρροφητήρα της σύριγγας. Τηρώντας τους κανόνες της ασηψίας, περάστε τον αυχενικό σωλήνα και στη μήτρα ανοίξτε την εξωτερική μεμβράνη της σύριγγας και αναρροφήστε τα περιεχόμενα. Στη συνέχεια, κλείστε το εξωτερικό περίβλημα και αφαιρέστε τον καθετήρα από τη μήτρα.

    προσαρτήματα της μήτρας: το υλικό από την πηγή της μόλυνσης μπορεί να επιτευχθεί μόνο με χειρουργική επέμβαση (πύον, εξιδρώματα, βιοψίες) ή κατά τη διάρκεια διαγνωστικών παρακέντηση των σχηματισμών όγκου στην πύελο, πραγματοποιείται μέσω του κολπικού θόλου (θα πρέπει να εξετάσει την πιθανότητα μόλυνσης του δείγματος της κολπικής μικροχλωρίδας). Σε ορισμένες περιπτώσεις, εάν η περιοχή μόλυνσης στα μήτρα της μήτρας επικοινωνεί με τη μήτρα, επαναλαμβανόμενες μελέτες του τραχηλικού σωλήνα μπορεί να είναι χρήσιμες όταν τα αποτελέσματα της μελέτης είναι του ίδιου τύπου. Ούρα: αφού ξεπλύνετε καλά τα εξωτερικά γεννητικά όργανα, συλλέγεται ένα μεσαίο τμήμα των ελεύθερων πρωινών ούρων σε ποσότητα 5-10 ml σε ένα αποστειρωμένο δοχείο. Λαμβάνοντας υπόψη ότι οι μικροοργανισμοί που περιέχονται στα ούρα αρχίζουν να πολλαπλασιάζονται σε θερμοκρασία δωματίου, το δείγμα πρέπει να παραδοθεί στο εργαστήριο εντός 1-2 ωρών, προκειμένου να αποφευχθούν τα ψευδή αποτελέσματα κατά την ποσοτικοποίηση του βαθμού βακτηριουρίας. Εάν είναι αδύνατο να τηρηθεί αυτή η απαίτηση, είναι δυνατόν να φυλάσσεται το δείγμα ούρων σε θερμοκρασία 4 ° C σε ψυγείο για όχι περισσότερο από 12 ώρες.

    Αίμα: καλλιέργεια αίματος (ανίχνευση βακτηριαιμίας) είναι απαραίτητη εάν υποψιάζεστε την ανάπτυξη συνδρόμου συστηματικής φλεγμονής. Η επίμονη υπερθερμία, ρίγη, υποθερμία, λευκοκυττάρωση, σημάδια πολυοργανικής δυσλειτουργίας χρησιμεύουν ως κατηγορηματικές ενδείξεις για μικροβιολογική εξέταση του αίματος. Ελήφθησαν δείγματα αίματος όσο το δυνατόν νωρίτερα από την εμφάνιση πυρετού 2- 3 φορές με ένα διάλειμμα 30-60 λεπτών από τις περιφερικές φλέβες των άνω άκρων (δειγματοληψία αίματος σε υψόμετρο πυρετός δεν αύξησε την ευαισθησία μέθοδο, η πιο σημαντική γίνεται η βέλτιστη ποσότητα του προσφερόμενου αίματος για την ανίχνευση της αιτιολογία της ασθένειας). Βέλτιστη χρήση τυπικών εμπορικών φιαλών με παρασκευασμένα θρεπτικά μέσα για την καλλιέργεια αερόβιων μικροοργανισμών και αυστηρών αναερόβιων. Ιδιαίτερη προσοχή στην τήρηση των κανόνων της ασηψίας: το δέρμα στο σημείο της φλεβοκέντησης αντιμετωπίζεται με διάλυμα 1-2% ιωδίου ή ποβιδονιοΐνης με κινήσεις από το κέντρο προς την περιφέρεια για τουλάχιστον 1 λεπτό. Μετά την απολύμανση, η ψηλάφηση του σημείου φλεβοπάθειας είναι απαράδεκτη. Αμέσως πριν τη διάτρηση της φλέβας, το δέρμα υποβάλλεται σε αγωγή με διάλυμα αιθανόλης 70%. Ο χειρισμός γίνεται σε αποστειρωμένα γάντια. Τα πλαστικά καλύμματα αφαιρούνται από τις φιάλες, τα πώματα από καουτσούκ σκουπίζονται με 70% διάλυμα αιθανόλης. Μετά τη λήψη αίματος από τη φλέβα, αλλάζουν τη βελόνα και, διαπερνώντας ένα ελαστικό πώμα, φέρνουν αίμα στο φιαλίδιο (περίπου 10 ml αίματος περιέχονται σε κάθε ένα από τα δύο φιαλίδια). Σε παιδιά ηλικίας κάτω του 1 έτους λαμβάνετε 0,5-1,0 ml αίματος σε μία φιάλη. Σε παιδιά ηλικίας από 1 έως 6 ετών, ο συνολικός όγκος αίματος που λαμβάνεται είναι 1 ml για κάθε έτος ζωής και ο όγκος αυτός κατανέμεται μεταξύ δύο φιαλών. Σε παιδιά και ενήλικες που ζυγίζουν από 30 έως 80 kg, κατανέμονται 10-20 ml αίματος μεταξύ δύο φιαλιδίων.

    Η λήψη ενός δείγματος από την περιφερειακή φλέβα και η άλλη από τον καθετήρα επιτρέπεται μόνο σε εξαιρετικές περιπτώσεις: εάν είναι απαραίτητο, προσδιορίστε τη βακτηριαιμία που σχετίζεται με καθετήρα ή σε περίπτωση αντικειμενικών δυσκολιών που σχετίζονται με τη φλεβοκέντηση.

    ΜΙΚΡΟΣΚΟΠΙΚΗ ΜΕΛΕΤΗ ΤΩΝ ΚΛΙΝΙΚΩΝ ΔΕΙΓΜΑΤΩΝ

    Ένα σημαντικό στάδιο της μικροβιολογικής έρευνας στη διάγνωση των ΣΜΝ και των ευκαιριακών λοιμώξεων. Σας επιτρέπει να παρέχει μια προκαταρκτική εκτίμηση της ποιοτικής και ποσοτικής σύνθεσης της μικροχλωρίδας στην παθολογική εστίαση, αξιολογεί την ποιότητα του υλικού σύλληψης (που αντιστοιχεί στην περιοχή της φλεγμονής, όπως η παρουσία του κολπικού επιθηλίου σε επιχρίσματα από του τραχήλου της μήτρας, αποτελεί παραβίαση των βιολογικές δοκιμασίες κανόνες επιλογής), καθώς και να εντοπίσει οι μικροοργανισμοί δεν αναπτύσσονται σε συνηθισμένα θρεπτικά μέσα (γονοκόκκα, τριχομονάδες, αυστηρά αναερόβια βακτήρια).

    Η ευαισθησία της μεθόδου της μικροσκοπίας φωτός είναι στο επίπεδο ανίχνευσης μικροοργανισμών σε ποσότητα 4-5 lg CFU / ml και περισσότερο. Επομένως, σε μερικές περιπτώσεις, οι μικροοργανισμοί που ανήκουν σε αιτιολογικούς παράγοντες μπορούν να ανιχνευθούν με μικροσκοπία. Αυτό αφορά κυρίως αυστηρά αναερόβια βακτηρίδια, συνήθως με χαμηλές παθογόνες ικανότητες, ο αιτιολογικός τους ρόλος εκδηλώνεται σε υψηλό ποσοτικό επίπεδο μετά τη συσσώρευση στην πηγή μόλυνσης. Λαμβάνοντας υπόψη ιδιαιτερότητα των πολλών ειδών μορφολογίας αυστηρά αναερόβιων (bakteroidyprevotelly, fuzobakterii, Mobiluncus, veylonelly, leptotrihii) και mikroaerofila gardnerelly, η ανίχνευσή τους σε χρώση Gram εκκένωσης κολπικά επιχρίσματα αποδεικνύει αιτιολογικός ρόλος τους. Βασικά σημαντική είναι η μικροσκοπία κολπικών κηλίδων στη διάγνωση βακτηριακής κολπίτιδας και άλλων κολπικών λοιμώξεων.

    Ωστόσο, η πλειονότητα των προαιρετικών αναερόβιων DIM δεν έχουν μορφολογική πρωτοτυπία και ο βαθμός παθογονικότητας και ευαισθησίας τους στα αντιβιοτικά, αντίθετα, είναι εξαιρετικά διαφορετικός. Ως εκ τούτου, για αυτή την ομάδα γίνεται απαραίτητη η πολιτισμική έρευνα της UPM. Επίσης διάγνωση της βακτηριακής κολπίτιδας, μικροσκοπική μέθοδος έχει το πλεονέκτημα σε σχέση με την εξέταση καλλιέργειας για τη διάγνωση της σχετικά σπάνια στα αναπαραγωγικά πολιτείες ηλικία κολπική microecology: Η κυτταρολυτική κολπίτιδα, ενδιάμεση μορφή microcenosis, ατροφία κολπικού επιθηλίου (τελευταίο χαρακτηριστικό του ηλικία εμμηνόπαυσης).

    Διάγνωση αιδοιοκολπικής καντιντίαση μπορεί συχνά να πραγματοποιηθεί υπό την ανίχνευση κολπικό έκκριμα επίχρισμα στις χρωματισμένο επιχρίσματα ή εγγενή στοιχεία μανιταριών εκβλάστηση κύτταρα ζύμης, θραύσματα pseudomycelium με βλαστόσπορων. Ανίχνευση μυκητιακών κυττάρων στα επιχρίσματα υποδεικνύοντας μεγάλες ποσότητες τους (πάνω από 4-5 lg cfu / ml) και πολύ συχνά συνοδεύονται από σοβαρή αντίδραση λευκοκυττάρων στο κολπικό επίχρισμα, και κλινικές εκδηλώσεις της φλεγμονής του κόλπου, αρκεί για να επιβεβαιωθεί η κλινική διάγνωση της κολπικής καντιντίασης.

    Κατά την εργαστηριακή διάγνωση της γονόρροιας είναι κατά κύριο λόγο διεξάγεται επίχρισμα λαμβάνεται από την ουρήθρα και του τραχήλου (αν δεν υπάρχει κανένα άλλο στοιχείο για την εξέταση τόπους: το φάρυγγα, επιπεφυκότα, του ορθού). Θα πρέπει να προσπαθήσετε να κάνετε παράλληλα για 2 εγκεφαλικά επεισόδια από κάθε θέση για χρώση μπλε και Gram. Για την οξεία γονόρροια χαρακτηρίζεται από την απουσία ή ελάχιστη αριθμό των εκπροσώπων της κανονικής μικροχλωρίδας (γαλακτοβάκιλλοι), ένας μεγάλος αριθμός των ουδετερόφιλων λευκοκυττάρων και την παρουσία των gram-αρνητικών διπλόκοκκους τοποθετημένο εντός λευκοκύτταρα (το φαινόμενο ημιτελή φαγοκυττάρωσης) και χωρίς λευκοκύτταρα. Η χρόνια γονόρροια χαρακτηρίζεται από την παρουσία ποικίλης μικροχλωρίδας μαζί με gram-αρνητικούς διπλοκόκκους μέσα και έξω από τα λευκοκύτταρα και έναν μεγάλο αριθμό ουδετερόφιλων. Τις περισσότερες φορές, η διάγνωση της γονόρροιας μπορεί να γίνει με βάση τη μικροσκόπηση των επιχρισμάτων Gram. Ωστόσο, οι έγκυες γυναίκες, εφήβους και τα παιδιά σίγουρα πολιτισμικών σπουδών με την αναγνώριση των ειδών της Neisseria gonorrhoeae να διαφοροποιηθούν από μη παθογόνο Neisseria, τα οποία αναγνωρίζουν τα συστατικά της φυσιολογικής κολπικής μικροχλωρίδας στα κορίτσια, και στην περίπτωση της λήψης υλικού από το στοματοφάρυγγα θα πρέπει να γνωρίζουν τον μεγάλο αριθμό ειδών των μη παθογόνων Neisseria σε αυτά τα επιχρίσματα σε οποιαδήποτε ηλικία

    Η μικροσκοπική μέθοδος παραμένει επί του παρόντος η κύρια στη διάγνωση της ουρογεννητικής τριχομονάζης. Διεξάγετε μια μελέτη σχετικά με το φυσικό φάρμακο και / ή έγχρωμο επίχρισμα. Μικροσκοπία του φυσικού φαρμάκου, είναι σημαντικό να θυμόμαστε ότι πρέπει να διερευνηθεί πρόσφατα υλικό (αποσπώμενη ουρήθρα, κόλπος) - στην προετοιμασία αποκαλύπτουν ζωντανό, κινητό Trichomonas. Για αυτό το παρασκεύασμα παρασκευάστηκε με τη μέθοδο του «συνθλίβονται» σταγονιδίων (εκφόρτωσης, οι οποίες με την προσθήκη ενός θερμό, κοντά στη θερμοκρασία του σώματος διάλυμα χλωριούχου νατρίου 0,9% καλύπτεται με ένα υάλινο κάλυμμα) ή «κρέμονται» σταγόνα (εναιώρημα που λαμβάνονται από τα ιζήματα τοποθετήθηκε σε ένα φρεάτιο ενός γυάλινη αντικειμενοφόρο πλάκα) και mikroskopiruyut σε μεγέθυνση 400 φορές όταν μειώνεται ο συμπυκνωτής. Τα παρασκευάσματα για βαφή με κυανό του μεθυλενίου, Gram ή Romanovsky-Giemsa παρασκευάζονται από αυτό το υλικό. Η διάγνωση καθορίζεται με βάση την ταυτοποίηση των τυπικών μορφών του Trichomonas vaginalis σε επιχρίσματα.

    Κατά την αξιολόγηση των αποτελεσμάτων της μικροσκοπίας του κολπικού επιχρίσματος, πρέπει να δώσουμε προσοχή στα ακόλουθα σημεία:

    • κατάσταση του κολπικού επιθηλίου: κυριαρχείται από τα κύτταρα της επιφάνειας, ενδιάμεσο ή parabasal στρώμα? η παρουσία των λεγόμενων κύτταρα «πυρήνα» - η επιφάνεια των επιθηλιακών κυττάρων, πυκνά προσκολλημένα σε αυτά gramvariabelnymi μικρά ραβδιά, κρύβοντας τα όρια των κυττάρων, ή κυττάρων «lozhnoklyuchevyh» (Σχήμα 6-1.) - αυξημένη προσκόλληση στα επιθηλιακά κύτταρα των Gram-θετικά ραβδία, συνήθως οι γαλακτοβάκιλλοι ( Σχ. 6-2).
    • αντίδραση λευκοκυττάρων: η παρουσία της, η σοβαρότητα, οι εκδηλώσεις φαγοκυττάρωσης, η ολοκλήρωσή της,
    • σύνθεση της μικροχλωρίδας: ποσοτική και ποιοτική εκτίμηση από μορφοτυπίες και ιδιότητες κακοποίησης.

    Το Σχ. 6-1. False Key Cells (μικροσκόπιο Gram smear).

    Το Σχ. 6-2. Νορμοσέση (μικροσκοπία Gram smear). Η αξιολόγηση της ολικής μικροβιακής μόλυνσης πραγματοποιείται σε ένα σύστημα 4 σημείων (κριτήρια Nugent, κάπως τροποποιημένα από εμάς) - από τον αριθμό των μικροβιακών κυττάρων που ανιχνεύονται στο ίδιο οπτικό πεδίο κατά τη διάρκεια της μικροσκοπίας με εμβάπτιση:

    + - μέχρι 10 μικροβιακά κύτταρα στο οπτικό πεδίο - τον ελάχιστο αριθμό, ++ - από 11 έως 100 μικροβιακά κύτταρα στο οπτικό πεδίο - ένα μέτριο αριθμό? +++ - από 100 έως 1000 μικροβιακά κύτταρα στο οπτικό πεδίο - ένας μεγάλος αριθμός?

    ++++ - περισσότερα από 1000 μικροβιακά κύτταρα στο οπτικό πεδίο - μια τεράστια ποσότητα.

    Η ποιοτική εκτίμηση της κολπικής μικροχλωρίδας περιλαμβάνει τη διαφοροποίηση όλων των μορφοτύπων ανάλογα με τις ιδιότητες του καλοήθους και τα μορφολογικά χαρακτηριστικά τους. Υπάρχουν μορφοτυπίες γαλακτοβακίλλων, φουσοβακτηρίων, βακτηριδίων, κινητουνούσκου, λεπτωτρίχιας, weillonellus, gardnerellas, καθώς και gram-θετικών κοκκίων, κολοβακτηρίδια, μύκητες ζύμης. Οι τριχομονάδες και άλλα παράσιτα μπορούν να βρεθούν στο επίχρισμα.

    Όταν υπάρχει υποψία για σύφιλη, η μικροσκοπία σκοτεινού πεδίου των αποσπώμενων διαβρωτικών και ελκών και η μέθοδος άμεσου ανοσοφθορισμού με τη χρήση της διαγνωστικής διάγνωσης ΑΤ σε T. pallidum δεν έχουν χάσει τη διαγνωστική τους αξία. Αυτές οι μέθοδοι χρησιμοποιούνται σε περιπτώσεις με κλινικές εκδηλώσεις στο δέρμα και τις βλεννώδεις μεμβράνες που είναι ύποπτες για σύφιλη. Επιπλέον, τα παρασκευάσματα μικροσκοπίας μπορούν να παρασκευαστούν από σημειακούς περιφερειακούς λεμφαδένες, εγκεφαλονωτιαίο υγρό, αμνιακό υγρό. Erozivnoyazvennuyu επιφάνεια απαλά (έτσι ώστε να μην λαμβάνουν αιμορραγία) καθαρίστηκε χρησιμοποιώντας ένα μάκτρο γάζα υγραίνεται 0,9% διάλυμα χλωριούχου νατρίου, στη συνέχεια προσεκτικά το άνοιγμα και το κλείσιμο των ελκών δύο δάκτυλα βάσης / διαβρώσεις, διεγείρουν την έκκριση ορώδους ρευστού, οι οποίες λαμβάνουν βακτηριολογική βρόχο ή απαλά ισχύουν για διαβρωτική επιφάνεια γυαλιού. Η προκύπτουσα εκροή σερίνης αναμειγνύεται με ισοδύναμη ποσότητα διαλύματος χλωριούχου νατρίου 0,9%, καλυμμένη με κάλυμμα και το φυσικό παρασκεύασμα μικροσκοπείται για την ανίχνευση του παθογόνου παράγοντα για μια σειρά χαρακτηριστικών μορφολογικών σημείων και τύπου κινήσεων. Απαιτείται κάποια εμπειρία προκειμένου να διαφοροποιηθεί, σε μικροσκοπία, το χλωμό treponema από τα συναισθήματα του ουρογεννητικού συστήματος.

    Περισσότερο αντικειμενική μπορεί να είναι η διάγνωση παρασκευασμάτων μικροσκοπίας με άμεσο ανοσοφθορισμό. Σε αυτές τις περιπτώσεις, η εκροή που λαμβάνεται από γυάλινη ολίσθηση από οποιαδήποτε υγρά του ιστού, οι επιφάνειες των παθολογικών περιοχών (συμπεριλαμβανομένου του υλικού αυτοψίας) ξηραίνονται στον αέρα, σταθεροποιούνται με αιθανόλη ή μεθανόλη. Μετά από αυτό, εφαρμόζεται μια αντι-τρεπονεμική σφαιρίνη ειδικά για το Τ. Pallidum στο παρασκεύασμα. Μικροσκοπική εξέταση του παράγοντα ανιχνεύεται με φωτεινό πράσινο ειδικό φθορισμό.

    Ανοσοφωταυγή μέθοδος - η κύρια και εργαστηριακή διάγνωση της HG, ενώ στην παρασκευή του παθολογικού υλικού ανιχνεύεται ιός Ag. Συνήθως χρησιμοποιείται η μέθοδος του άμεσου ανοσοφθορισμού, πράγμα που καθιστά δυνατό τον προσδιορισμό χωριστά και των δύο τύπων HSV και των οροτύπων HSV1 και HSV2. Η ευαισθησία και η ειδικότητα της μεθόδου εξαρτώνται από την ποιότητα των διαγνωστικών κιτ που χρησιμοποιούνται. Το υλικό για τη μελέτη είναι συνήθως το υγρό από τα ανοιγμένα κυστίδια, η απόρριψη διαβρωτικών επιφανειών του δέρματος και των βλεννογόνων ή η απόξεση από τα τοιχώματα του τραχήλου της μήτρας (με λανθάνουσα μορφή μόλυνσης). Το υλικό λαμβάνεται με βακτηριολογικό βρόχο ή ειδικό σπόγγο και μεταφέρεται σε γυάλινη ολίσθηση.

    Στις ουρογεννητικές χλαμυδίες, η ανίχνευση των χλαμυδίων Ar χρησιμοποιώντας μικροσκοπία ανοσοφθορισμού είναι μία από τις κύριες εργαστηριακές διαγνωστικές μεθόδους. Συνήθως χρησιμοποιείται άμεσος ανοσοφθορισμός, κατά τη διάρκεια του οποίου εφαρμόζονται μονοκλωνικά αντισώματα σε διαφορετικές ομάδες Chlamydia Ag - λιποπολυσακχαρίτη (ομάδα), τα κύρια πρωτεϊνικά είδη της εξωτερικής μεμβράνης του Chlamydia και αντισώματα στα ανασυνδυασμένα Ag χλαμύδια. Η ποιότητα των διαγνωστικών προσδιορίζει τον βαθμό ευαισθησίας της μεθόδου. Μεγάλη σημασία στην αξιολόγηση της ποιότητας του άμεσου ανοσοφθορισμού λήψη υλικό έχει: α επίχρισμα σε ένα γυάλινο δείγμα που λαμβάνεται από τον τράχηλο πρέπει να είναι παρόντες κυλινδρικό επιθηλιακά κύτταρα και απουσιάζει πλακώδη επιθηλιακά κύτταρα, ερυθροκύτταρα και λευκοκύτταρα. Το αποτέλεσμα θεωρείται θετικό αν στα επιχρίσματα ενός αποσπώμενου μικροσκοπίου με φθορίζον μικροσκόπιο σε πορτοκαλί-καφέ υπόβαθρο επιθηλιακών κυττάρων βρίσκεται τουλάχιστον 5 στοιχειώδη σώματα με αύξηση 100 φορές. Λόγω πιθανών ψευδώς θετικών αποτελεσμάτων, αυτή η μέθοδος δεν συνιστάται για τη μελέτη υλικών που προέρχονται από το ρινοφάρυγγα και το ορθό.

    ΠΟΛΙΤΙΣΤΙΚΗ ΕΡΕΥΝΑ

    Η μέθοδος φύτευσης και απομόνωσης καθαρών καλλιεργειών παθογόνων της νόσου χρησιμεύει ως "χρυσό πρότυπο" μικροβιολογικών διαγνωστικών. Μαζί με τη μικροσκοπία, η πολιτιστική έρευνα είναι η κύρια μέθοδος διάγνωσης της γονόρροιας, της τριχομονάσης, των χλαμυδίων. Οι μέθοδοι μοριακής και βιολογικής έρευνας δεν είναι ακόμη αρκετά συγκεκριμένες για να ανιχνεύσουν αυτά τα παθογόνα STI για να αντικαταστήσουν τις κλασσικές μεθόδους, αλλά, αναμφισβήτητα, το μέλλον τους ανήκει. Μια διαφορετική κατάσταση έχει προκύψει με ευκαιριακές λοιμώξεις του γεννητικού συστήματος, ο αριθμός των οποίων στην εποχή των αντιβιοτικών και η αστικοποίηση της ζωής της κοινωνίας αυξάνεται σταθερά, η αιτιολογική τους δομή και η ευαισθησία τους στα αντιβιοτικά αλλάζουν δυναμικά. Η συχνή αντοχή στα αντιβιοτικά αυτών των μικροοργανισμών προκαλεί την αποτυχία της θεραπείας, επομένως, μια επαρκής επιλογή ορθολογικής αιτιολογικής θεραπείας στις σύγχρονες συνθήκες αναγνωρίζεται ως ένα διαρκές κλινικό πρόβλημα.

    Είναι γνωστό ότι οι αιτιολογικοί παράγοντες των φλεγμονωδών διεργασιών των γεννητικών οργάνων μπορεί να είναι μια ποικιλία από UPM, κανονικά μέρος του παροδικού συστατικού της εγχώριας (φυσιολογικής) μικροχλωρίδας του κόλπου και των παρακείμενων βιότοπων. Οι παθογόνες ιδιότητές τους εκδηλώνονται μόνο κάτω από ορισμένες συνθήκες, διαταραχές της ανοσοποιητικής ομοιόστασης του μακροοργανισμού και τοπική αντίσταση αποικισμού. Υπό τις συνθήκες αυτές, η μικροβιολογική διάγνωση θα πρέπει να λαμβάνει υπόψη τον πιθανό αιτιολογικό ρόλο ενός ευρέος φάσματος παθογόνων παραγόντων και όχι μόνο συγκεκριμένου παθογόνου παράγοντα, όπως στη διάγνωση κλασικών λοιμωδών νόσων που προκαλούνται από απόλυτα παθογόνα. Το έργο της μελέτης δεν είναι μόνο η ταυτοποίηση των μικροοργανισμών που βρίσκονται στο παθολογικό υλικό, αλλά και η λογική του αιτιολογικού ρόλου τους στη φλεγμονώδη διαδικασία σε αυτόν τον ασθενή. Επομένως, όταν σπέρνουν κλινικά υλικά, ειδικά από τόπους, και συνήθως έχουν μικροχλωρίδα, είναι πολύ σημαντικό να χρησιμοποιηθούν τα πλέον ευπροσάρμοστα θρεπτικά μέσα που είναι κατάλληλα για την καλλιέργεια ενός ευρέος φάσματος μικροοργανισμών. Σε αυτή την περίπτωση, είναι απαραίτητο να ληφθούν υπόψη οι ποσοτικές αναλογίες της ανάπτυξης διαφόρων τύπων μικροοργανισμών στην πρωτογενή σπορά, καθώς ο πραγματικός αιτιολογικός παράγοντας ανήκει κατά κανόνα στον επικρατούμενο ρόλο μεταξύ των συνεργατών. Ωστόσο, υπάρχουν είδη που εμφανίζουν παθογόνες ιδιότητες σε μικρή ποσότητα (στρεπτόκοκκοι των ομάδων Α και Β, πρωτεΐνες, Klebsiella, Staphylococcus aureus, Listeria κ.λπ.).

    Η μικροβιολογική διάγνωση ευκαιριακών λοιμώξεων του κόλπου βασίζεται σε μια ολοκληρωμένη αξιολόγηση των αποτελεσμάτων των μικροσκοπικών και πολιτισμικών μελετών. Έτσι αυστηρώς αναερόβια μικροχλωρίδα συστατικό αξιολογείται δια μικροσκοπίας grammazkov - ένας μεγάλος αριθμός των αναερόβιων morphotypes ανιχνεύεται με μικροσκοπία φωτός (ο αριθμός τους υπερβαίνει ένα κολπικό έκκριμα των lg 6 CFU / ml), υποδεικνύοντας αιτιολογικό ρόλο τους. Έτσι αναερόβιο ευαισθησία σε αντιβιοτικά έχει επί του παρόντος κανένα κλινικό σκοπιμότητας επειδή η μεγάλη πλειοψηφία των οποίων είναι ιδιαίτερα ευαίσθητα στα αντιβιοτικά με την αντι-αναερόβια δραστηριότητα (κλινδαμυκίνη, μετρονιδαζόλη).

    Αντίθετα, όσον αφορά τους προαιρετικούς αερόβιους και αερόβιους μικροοργανισμούς, η διαγνωστική αξία της μικροσκοπικής εξέτασης της κολπικής έκκρισης μειώνεται σημαντικά. Αυτό οφείλεται, πρώτον, στο γεγονός ότι οι παθογόνες ικανότητες αυτών των βακτηριδίων μπορούν να εκδηλωθούν σε μια σχετικά μικρή (3-5 lg CFU / ml) ποσότητα, η οποία δεν ανιχνεύεται με μικροσκοπία. Δεύτερον, ακόμα και αν τα morphotypes των προαιρετικών αναερόβιων βακτηρίων βρίσκονται σε γραμμάρια, είναι μορφολογικά τα ίδια σε πολλά είδη και γένη βακτηρίων (αυτά είναι κολοβακτηρίδια ή gram-θετικά κοκκία). Ταυτόχρονα, οι παθογόνες ιδιότητές τους και η ευαισθησία τους στα αντιβιοτικά μπορεί να είναι πολύ διαφορετικές. Ως εκ τούτου, για το τμήμα χαρακτηρισμού fakultativnoanaerobnoy microcenosis και μικροαεροφιλικές (κυρίως γαλακτοβάκιλλοι), η οποία μπορεί να είναι παρόμοια μορφολογία με πολλούς τύπους obligatnoanaerobnyh βακτήρια (. Clostridia, ευβακτήρια, propionibacteria et αϊ), είναι αναγκαίο Καλλιέργειες - σπορά κολπικό έκκριμα. Για τους σκοπούς αυτούς, χρησιμοποιείται 5% αίμα άγαρ (το πλέον παγκόσμιο μέσο για τα περισσότερα UPM), άγαρ Saburo (για την απομόνωση μυκήτων), μέσο MPC (για την καλλιέργεια γαλακτοβακίλλων).

    Αποτελέσματα των μελετών καλλιέργειας παράσχει μια ευκαιρία για την αξιολόγηση της σύνθεσης των ειδών και την αναλογία των διαφόρων τύπων των μικρο-οργανισμών στο συνδέσμου, συμπεριλαμβανομένων των μυκήτων και οι γαλακτοβάκιλλοι και επομένως επιβεβαιώνουν τη ανήκουν στο γένος Lactobacillus laktomorfotipov εκείνα που ανιχνεύθηκαν με μικροσκοπία grammazkov. Απομόνωση από παθολογικό υλικό και την ταυτοποίηση των διαφόρων ειδών της οικογένειας Enterobacteriaceae, σταφυλόκοκκοι, στρεπτόκοκκοι, nonfermenting βακτήρια, Neisseria, ροπαλόμορφα βακτήρια, μύκητες και άλλους μικροοργανισμούς μετά ποσοτικοποίηση της ανάπτυξης τους για να καθοριστεί ο βαθμός της αιτιολογικού σημασίας τους στην ανάπτυξη της κολπίτιδας σε έναν συγκεκριμένο ασθενή.

    Επιπλέον, σε περιπτώσεις όπου η διάγνωση της βακτηριακής κολπίτιδας συναρμολογείται επί μικροσκοπία των gram-αρνητικών επίχρισμα, τα αποτελέσματα της καλλιέργειας μπορεί να αποκαλύψει αυξημένη τίτλοι UTM (μανιτάρια, εντερόκοκκοι, τα κολοβακτηρίδια και άλλα βακτήρια), το οποίο μπορεί να προκαλέσει επιπλοκές μετά αιτιώδη φάρμακα θεραπεία με αντι-αναερόβια δραστηριότητα. Ιδιαίτερα πρέπει να ληφθούν υπόψη οι μικροοργανισμοί, οι οποίοι ακόμη και σε χαμηλές συγκεντρώσεις αποτελούν παράγοντα αυξημένου κινδύνου για το έμβρυο (Listeria, Streptococcus Groups Α και Β).

    Μέθοδοι για την αναγνώριση των νουκλεϊνικών οξέων

    Μέθοδοι ανίχνευσης παθογόνων DNA και RNA χρησιμοποιούνται επί του παρόντος κυρίως για τη διάγνωση ιικών λοιμώξεων. Οι μέθοδοι γονιδιακής διάγνωσης βασίζονται στην αναγνώριση των αλληλουχιών νουκλεοτιδίων απευθείας στο παθολογικό υλικό με τη βοήθεια μοριακών ανιχνευτών - τεχνητά προερχόμενων νουκλεϊνικών οξέων συμπληρωματικών των νουκλεϊνικών οξέων και επισημασμένων με βιοτίνη ή ραδιενεργό σήμα.

    Ένα χαρακτηριστικό της μεθόδου PCR είναι η πολλαπλή αντιγραφή (ενίσχυση, αντιγραφή) χρησιμοποιώντας το ένζυμο ϋΝΑ πολυμεράσης ενός ειδικού τεμαχίου ϋΝΑ που αποτελείται από μερικές δεκάδες ή εκατοντάδες ζεύγη νουκλεοτιδίων, το οποίο είναι μοναδικό, δηλαδή ειδικό για αυτόν τον τύπο παθογόνου ιού. Ο μηχανισμός αντιγραφής είναι τέτοιος ώστε η ολοκλήρωση του θραύσματος μπορεί να ξεκινήσει μόνο σε ορισμένα αρχικά τεμάχια, για τη δημιουργία των οποίων σε δεδομένες περιοχές του DNA, χρησιμοποιούνται εκκινητές - ειδικά συνθεμένα ολιγονουκλεοτίδια. Οι εκκινητές είναι συμπληρωματικοί προς τις αλληλουχίες εντός των ορίων ενός συγκεκριμένου θραύσματος και η σύνθεση του DNA προχωρά μόνο εντός αυτών των ορίων.

    Η διαδικασία PCR συνίσταται σε έναν μεγάλο αριθμό κύκλων σύνθεσης (ενίσχυση) ενός συγκεκριμένου θραύσματος ϋΝΑ, στη συσσώρευση μεγάλου αριθμού αντιγράφων, τα οποία στη συνέχεια μπορούν να ανιχνευθούν με συμβατικές μεθόδους ανίχνευσης (ανάλυση ανοσοφθορισμού, ηλεκτροφόρηση).

    ● απλότητα εκτέλεσης, ● δυνατότητα πλήρους αυτοματοποίησης, ● ταχύτητα απόκτησης αποτελέσματος, ● μικρή ποσότητα παθολογικού υλικού που απαιτείται για την έρευνα, ● δυνατότητα διάγνωσης οξειών, χρόνιων, λανθάνουσων λοιμώξεων,

    ● ταυτοποίηση των μη καλλιεργητών, επίμονων παθογόνων.

    Η ευαισθησία της PCR είναι η πιο τέλεια ως διαγνωστική μέθοδος (πολλές τάξεις μεγέθους υψηλότερες από άλλες δοκιμές). Η ιδιαιτερότητα της μεθόδου είναι επίσης υψηλή, αλλά μέχρι στιγμής τα περισσότερα από τα συστήματα δοκιμής δεν είναι αρκετά αξιόπιστα για να εξαναγκάσουν τις κλασσικές μεθόδους διάγνωσης ακόμη και των απόλυτων παθογόνων.

    Όσον αφορά τις ευκαιριακές μολύνσεις, η σημασία των μοριακών γενετικών διαγνωστικών μεθόδων δεν μπορεί ακόμη να αναγνωριστεί ως σημαντική, καθώς ο καθοριστικός παράγοντας στην ανάπτυξη τέτοιων φλεγμονωδών διεργασιών είναι ο ποσοτικός παράγοντας και όχι η παρουσία του ίδιου του μικροοργανισμού στον υπό εξέταση τόπο.

    Επί του παρόντος, οι μέθοδοι PCR χρησιμοποιούνται ευρέως στη διάγνωση των ιογενών, παρασιτικών και βακτηριακών ΣΤΠ, συχνά ως πρωταρχικός έλεγχος, καθώς και στον έλεγχο της θεραπείας σε συνδυασμό με άλλες μεθόδους εργαστηριακής διάγνωσης. Χρησιμοποιώντας την πιο πρόσφατη τεχνολογία, όπως η PCR σε πραγματικό χρόνο και το NASBA, είναι δυνατόν να προσδιοριστεί η ακριβής ποσότητα του ιού σε ασθενείς με HIV.

    ΣΕΡΟΛΟΓΙΚΕΣ ΔΙΑΓΝΩΣΤΙΚΕΣ ΜΕΘΟΔΟΙ

    Μέθοδοι που αναγνωρίζουν συγκεκριμένα παθογόνα AT και Ar. Ο ρόλος τους είναι σημαντικός, ιδίως σε περιπτώσεις όπου η απομόνωση του παθογόνου παράγοντα παρουσιάζει σημαντικές δυσκολίες. Όταν ανιχνεύεται συγκεκριμένη ΑΤ, είναι απαραίτητο να διαπιστωθεί αύξηση των τίτλων τους, σε σχέση με την οποία μελετήθηκαν οι συνδυασμένοι οροί με διάστημα 2-3 εβδομάδων. Ο ορισμός των κατηγοριών ανοσοσφαιρινών περιγράφει σαφώς τα στάδια της μολυσματικής διαδικασίας και σε ορισμένες περιπτώσεις μπορεί να χρησιμεύσει ως πρόγνωση για την πορεία της.

    Μεγάλη σημασία έχουν οι μέθοδοι ανίχνευσης παθογόνων Ag. Μπορούν να ανιχνευθούν ήδη στα πρώτα στάδια της μολυσματικής διαδικασίας, γεγονός που καθιστά δυνατή τη ρητή διάγνωση και ο ποσοτικός προσδιορισμός του Ar στη δυναμική της ασθένειας χρησιμεύει ως κριτήριο για την αποτελεσματικότητα της θεραπείας.

    Οι ορολογικές μέθοδοι έχουν αποκτήσει πρωταρχική σημασία στη διάγνωση της σύφιλης και της λοίμωξης από τον HIV. Στη διάγνωση της λοίμωξης από HIV χρησιμοποιείται συνήθως ανοσοπροσροφητική δοκιμασία συνδεδεμένη με ένζυμα, η οποία επιτρέπει την επίτευξη θετικών αποτελεσμάτων της μελέτης ήδη από 1-1,5 μήνες μετά τη μόλυνση. Τα θετικά αποτελέσματα διαλογής με τη χρήση ανοσοπροσδιορισμού ενζύμων απαιτούν επιβεβαίωση με τη μέθοδο ανοσοκηλίδας, η οποία επιτρέπει την επαλήθευση αντισωμάτων σε διάφορες ιικές πρωτεΐνες.

    Στη διάγνωση της σύφιλης χρησιμοποιείται σήμερα μια ποικιλία ορολογικών μεθόδων, οι οποίες επιτρέπουν την ανίχνευση αντισωμάτων σε διάφορους καθοριστικούς παράγοντες του AH T. pallidum στο σώμα. Ανάλογα με το χρησιμοποιούμενο Ag, οι ορολογικές αντιδράσεις χωρίζονται σε δύο ομάδες: τρεπονεμικές και μη τρεπονεμικές. Το πρώτο χρησιμοποιείται για έλεγχο. Είναι τεχνικά απλές, δεν απαιτούν πολύ χρόνο, μια ποσοτική εκδοχή της αντίδρασης με τον προσδιορισμό του τίτλου ΑΤ είναι δυνατή, γεγονός που τους επιτρέπει να αξιολογηθεί η αποτελεσματικότητα της θεραπείας. Ωστόσο, αυτές οι δοκιμές δεν ανιχνεύουν την ΑΤ κατά τις πρώτες 2-4 εβδομάδες πρωτογενούς σύφιλης και είναι πιθανές ψευδώς θετικές και ψευδώς αρνητικές αντιδράσεις.

    Οι δοκιμασίες Treponemal έχουν μεγάλη εξειδίκευση και επιτρέπουν την επιβεβαίωση των αποτελεσμάτων των μη τρεπονεμικών εξετάσεων. Ωστόσο, οι δοκιμασίες treponemal ήταν αναξιόπιστες στη μελέτη του εγκεφαλονωτιαίου υγρού (εκτός από την αντίδραση της άμεσης αιμοσυγκόλλησης), δεν χρησιμοποιούνται επίσης ως έλεγχος για την αποτελεσματικότητα της θεραπείας και δεν αποκλείεται η πιθανότητα ψευδώς θετικών αντιδράσεων.

    Με ευκαιριακές βακτηριακές λοιμώξεις, οι αιτιολογικοί παράγοντες των οποίων έχουν πολλούς συνηθισμένους αργύρους με το αργαλικό Ag του ξενιστή και οι οποίοι χρησιμεύουν ως ασθενείς διεγέρτες για την παραγωγή ειδικών αντισωμάτων, πρακτικά δεν χρησιμοποιούνται ορολογικές διαγνωστικές μέθοδοι.

    ΕΡΜΗΝΕΙΑ ΤΩΝ ΑΠΟΤΕΛΕΣΜΑΤΩΝ ΤΗΣ ΜΙΚΡΟΒΙΟΛΟΓΙΚΗΣ ΕΡΕΥΝΑΣ

    ΑΞΙΟΛΟΓΗΣΗ ΤΩΝ ΑΠΟΤΕΛΕΣΜΑΤΩΝ ΤΩΝ ΜΙΚΡΟΒΙΟΛΟΓΙΚΩΝ ΕΡΕΥΝΩΝ ΤΩΝ ΓΡΑΜΜΙΚΩΝ ΓΕΝΙΚΩΝ ΟΡΓΑΝΩΝ

    Κατά την αξιολόγηση των αποτελεσμάτων των μικροβιολογικές μελέτες των διαχωρισμένων γυναικείων γεννητικών οργάνων πρέπει να θεωρηθεί ένα σύνολο χαρακτηριστικών σε κάθε περίπτωση: δεδομένα μικροσκοπία πρωτογενές Παπανικολάου υλικό δοκιμής, τα αποτελέσματα της άμεσης σποράς σε στερεά θρεπτικά μέσα (ποσοτική εκτίμηση της ανάπτυξης των διαφόρων τύπων), καθώς και τα κλινικά συμπτώματα της ασθένειας και το ιστορικό του ασθενούς. Έτσι, κατά την έρευνα του υλικού κλειστών κοιλοτήτων (διάστικτα σχηματισμοί όγκων στην πύελο, αμνιακό υγρό) καθώς και τα όργανα, φυσιολογικά άσηπτο (περιεκτικότητα σε μήτρα απόξεση του ενδομητρίου κομμάτια των οργάνων και ιστών που έχουν αφαιρεθεί κατά τη διάρκεια της χειρουργικής επέμβασης), την ανάπτυξη μικροοργανισμών, ειδικά στην μονοκαλλιέργεια, στοιχεία του αιτιολογικού ρόλου τους. Στη μελέτη του υλικού από τους τόπους, και συνήθως με μια ποικιλία μικροχλωρίδας, αποδίδεται μεγάλη σημασία στην εκτίμηση της σύνθεσης των ειδών, στην ποσοτικοποίηση της ανάπτυξης διαφόρων ειδών που αναπτύσσονται κατά την πρωτογενή σπορά, στην ομοιομορφία των αποτελεσμάτων με επαναλαμβανόμενες μελέτες, καθώς και σε κλινικά δεδομένα. Με βάση την ολοκληρωμένη αξιολόγηση των αποτελεσμάτων της μικροσκοπίας και της καλλιέργειας της απόρριψης του κόλπου, μπορούν να προταθούν τα ακόλουθα μικροβιολογικά κριτήρια για την εκτίμηση της κατάστασης της κολπικής μικροκεντίας για τις μεμονωμένες νοσολογικές μορφές σε γυναίκες αναπαραγωγικής ηλικίας.

    ΝΟΡΜΟΚΙΝΩΣΗ
    • Μικροσκοπική επίχρισμα, Gram βάφονται (Σχήμα 6-3.): ♦ κολπικού επιθηλίου περιέχει τα κύτταρα των επιφανειακών στρωμάτων, το ενδιάμεσο στρώμα είναι λιγότερο συχνή κύτταρα (αναλογία μπορεί να ποικίλει ανάλογα με τις φάσεις του έμμηνου κύκλου, στην εγκυμοσύνη, πολλές ενδιάμεσες κύτταρα), κύτταρα «κλειδί» λείπει μερικές φορές συναντούν κύτταρα «lozhnoklyuchevye»? αντίδρασης ♦ λευκοκυττάρων είναι απούσα ή κακώς εκφράζονται - ατομική λευκοκύτταρα στο οπτικό πεδίο? ♦ συνολικός αριθμός των μικροοργανισμών μετρίου ή μεγάλου? ♦ κυρίαρχη morphotype - γαλακτοβάκιλλοι άλλες mo οι τύποι είτε απουσιάζουν είτε ο αριθμός τους υπολογίζεται

    μεμονωμένα μικροβιακά κύτταρα σε σπάνια οπτικά πεδία.

  • Πολιτιστική έρευνα: ♦ ολική μικροβιακή μόλυνση - 6-8 lg CFU / ml · ♦ απόλυτη υπεροχή λακτοβακίλλων.

    ♦ UPM σε χαμηλό τίτλο (λιγότερο από 3 lg CFU / ml) ή απουσία.

    Το Σχ. 6-3. Κύτταρα "κλειδί" (μικροσκόπιο Gram smear).

    ΒΑΚΤΗΡΙΚΗ ΒΑΓΙΝΩΣΗ
    • Μικροσκοπική επίχρισμα βάφονται Gram (Εικ. 6-4): ♦ κολπικού επιθηλίου περιέχει τα κύτταρα των επιφανειακών στρωμάτων είναι σπάνια ενδιάμεσο κύτταρα συχνά - κύτταρα «κλειδί»? Αντίδραση λευκοκυττάρων ♦ είναι συνήθως απούσα? ♦ συνολικός αριθμός των μικροοργανισμών μαζική, λιγότερο - μεγάλη;

    ♦ υπάρχουν μορφοτυπίες αυστηρών αναερόβιων και γαρντερέλα, οι λακτομοροτυπίες απουσιάζουν ή δεν προσδιορίζονται ως ενιαίες σε όλα τα πεδία.

  • Μέθοδος καλλιέργειας: ♦ η συνολική μικροβιακή μόλυνση υπερβαίνει τα 9 lg CFU / ml. πολυμικροβιακή μικροχλωρίδα με απόλυτη επικράτηση υποχρεωτικών αναερόβιων ειδών και gardnerella ♦ χρησιμοποιώντας μόνο αεροβικές καλλιεργητικές συνθήκες, η ανάπτυξη μικροοργανισμών απουσιάζει ή παρατηρείται ανάπτυξη UPM, συχνά σε μικρό τίτλο,

    ♦ δεν υπάρχει ανάπτυξη γαλακτοβακίλλων ή ο τίτλος τους είναι σημαντικά μειωμένος (λιγότερο από 5 lg CFU / ml).

    Το Σχ. 6-4. Βακτηριακή βακτηρίωση (μικροσκοπία κηλίδας Gram).

    ΘΕΡΑΠΕΥΤΙΚΗ ΚΑΝΟΝΙΔΟΣ

    Ανάλογα με τη συγκέντρωση των μυκήτων στην εκκένωση του κόλπου και τη συνοδευτική μικροχλωρίδα, μπορούν να διακριθούν 3 μορφές κολπικής καντιντίασης.

    • επιχρίσματα Μικροσκοπίας βάφονται με βαφή Gram (Σχήμα 6-5.): ♦ κολπικό επιθήλιο κυρίως επιφανειακά στρώματα, αλλά μπορεί να είναι ακόμη πολλά ενδιάμεσα και παραβασικών κύτταρα (ανάλογη με τη σοβαρότητα της κλινικής πορείας της νόσου)? ♦ μέτρια αντίδραση λευκοκυττάρων (10-15 λευκοκύτταρα σε οπτικό πεδίο) σε προφέρεται (30-50 και περισσότερο λευκοκύτταρα στο οπτικό πεδίο)? ♦ συνολικός αριθμός των μικροοργανισμών μέτρια ή μεγάλη?

    ♦ κυριαρχούν μορφοτυπίες γαλακτοβακίλλων, υπάρχουν κύτταρα ζυμομυκήτων, θραύσματα ψευδομυελίου με βλαστοσπόρια.

  • Μέθοδος καλλιέργειας: ♦ ο συνολικός αριθμός των μικροοργανισμών δεν υπερβαίνει τα 8 lg CFU / ml · ♦ οι μύκητες ζύμης είναι παρόντες σε τίτλο μεγαλύτερο από 4 lg CFU / ml.

    ♦ Lactobacilli σπέρνονται σε τίτλο μεγαλύτερο από 6 lg CFU / ml.

    Το Σχ. 6-5. Η κολπίτιδα από Candida (μικροσκοπία επίχρωσης, χρώση με Gram).

    Ο συνδυασμός της βακτηριακής κολπίτιδας και της κολπικής κολπίτιδας.

    • Μικροσκοπική επίχρισμα βάφονται Gram (Εικ 6-6.): ♦ κολπικό επιθήλιο κυρίως επιφανειακά στρώματα είναι παρόντα «κλειδί» επιθηλιακά κύτταρα? ♦ μέτρια ή σοβαρή αντίδραση λευκοκυττάρων? ♦ συνολικός αριθμός των μικροοργανισμών ή μεγάλων μαζική? ♦ κυριαρχείται morphotypes αυστηρές αναερόβιων και Gardnerella ζυμομυκητικά κύτταρα και / ή θραύσματα του ψευδομυκηλίου του μύκητα.

    ♦ οι λακτονμορφοτυπίες απουσιάζουν ή είναι ορατές μεμονωμένες.

  • Η μέθοδος καλλιέργειας: ♦ μαζική συνολικός αριθμός των μικροοργανισμών (πάνω από lg 9 CFU / ml), αλλά μόνο όταν καλλιεργούνται υπό αερόβιες συνθήκες ανάπτυξης σήμα των ζυμών σε μέτριο ή υψηλό τίτλο (4-7 lg CFU / ml)? Ανάπτυξη ♦ γαλακτοβακίλλων ή offline χαμηλό τίτλο (λιγότερο από 4 lg CFU / ml).

    ♦ μικροοργανισμοί που κυριαρχούν στη φύτευση - βακτηριοειδή, Prevollae, Gardnerella, αναερόβια κοκκία.

    Το Σχ. 6-6. Ένας συνδυασμός βακτηριακής κολπίτιδας και καντιντικής κολπίτιδας (μικροσκόπιο Gram smear).

    Ασυμπτωματική μεταφορά μανιταριών.

    • Μικροσκοπική επίχρισμα βάφονται με βαφή Gram: ♦ περιέχει τα κολπικά επιθηλιακά κύτταρα κατά προτίμηση επιφανειακά στρώματα? Αντίδραση λευκοκυττάρων ♦ δεν εκφράζεται, απομονωμένα λευκοκύτταρα στο οπτικό πεδίο? ♦ συνολικός αριθμός των μικροοργανισμών μέτρια ή μεγάλη?

    ♦ Κυριαρχούν οι μορφοτυπίες των γαλακτοβακίλλων, οι μύκητες συνήθως δεν αποκαλύπτονται ή απαντώνται σε σπάνια πεδία θέασης μονών κυττάρων ζύμης.

  • Μέθοδος καλλιέργειας: ♦ Ο συνολικός αριθμός των μικροοργανισμών δεν υπερβαίνει τα 8 lg CFU / ml.

    ΜΗ ΕΙΔΙΚΟ ΒΑΓΙΝΙΤΗ

    Μικροσκοπική επίχρισμα, Gram βάφονται (Σχήμα 6-7.): ♦ κολπικού επιθηλίου περιέχει τα επιφανειακά και ενδιάμεσα κύτταρα κατά τη διάρκεια των φλεγμονωδών κυττάρων παραβασικών συναντιούνται διαδικασία? ♦ εκφράζονται σε διάφορους βαθμούς αντίδρασης λευκοκυττάρων (πάνω από 10 λευκοκύτταρα ανά οπτικό πεδίο)? ♦ συνολική οι μικροοργανισμοί είναι μέτριοι · ♦ δεν υπάρχουν λακτοβάκιλλοι ή ο αριθμός τους είναι σημαντικά μειωμένος (σε λίγες περιπτώσεις στο οπτικό πεδίο) ·

    ♦ κυριαρχούν μορφοτυπίες UPM - κολοβακτηρίδια ή θετικά κατά gram cocci.

    Μέθοδος καλλιέργειας: ♦ έλλειψη ανάπτυξης λακτοβακίλλων ή ελάχιστης ποσότητας,

    • Ανάπτυξη προαιρετικού αερόβιου UPM, συνηθέστερα ενός τύπου σε υψηλή λεζάντα.

    Το Σχ. 6-7. Μη-ειδική κολπίτιδα (μικροσκοπία επίχρωσης, χρώση Gram).

    ΕΝΔΙΑΜΕΣΗ ΕΠΙΛΟΓΗ ΜΙΚΡΟΚΙΝΗΣΗΣ
    • Μικροσκοπική επίχρισμα βάφονται με βαφή Gram: ♦ περιέχει τα επιφανειακά κύτταρα κολπικού επιθηλίου μπορεί να ανταποκριθεί μονά κύτταρα «κλειδί» ilinablyudat τάση για το σχηματισμό τους? ♦ αριθμό λευκοκυττάρων όχι περισσότερο από 10 οπτικό πεδίο? ♦ συνολικός αριθμός των μικροοργανισμών μέτρια ή μεγάλη?

    ♦ Κυριαρχούν μορφοτυπίες αυστηρών αναερόβιων και γαρντερέλα σε συνδυασμό με μετρίως μειωμένο τίτλο γαλακτοβακίλλων.

  • Μέθοδος καλλιέργειας: ♦ Ο συνολικός αριθμός μικροοργανισμών είναι 6-8 lg CFU / ml · ♦ Ο τίτλος των γαλακτοβακίλλων μειώνεται, αλλά μπορεί να φτάσει σε μέτριες τιμές (5-6 lg CFU / ml).

    ♦ μέτριο τίτλο υποχρεωτικών αναερόβιων και γαρντερέλα (5-7 lg CFU / ml).

    ΚΥΤΛΟΥΤΙΚΗ ΒΑΓΙΝΩΣΗ
    • Μικροσκοπία χρώματος Gram (Εικόνα 6-8): ♦ Η συντριπτική πλειονότητα των επιθηλιακών κυττάρων είναι κυτταρόλυση. στοιχεία καταστροφής κυττάρων - αποτρίχωση, εκτεθειμένοι πυρήνες επιφανειακών και ενδιάμεσων κυττάρων επικρατούν σε ένα επίχρισμα · ♦ τα λευκοκύτταρα απουσιάζουν ή ο αριθμός τους δεν υπερβαίνει τα 10 στη θέα ·

    ♦ μεγάλες ποσότητες μικροχλωρίδας, που αντιπροσωπεύονται από τυπικούς μορφοτύπους γαλακτοβακίλου.

  • Μέθοδος καλλιέργειας: ♦ Άφθονη ανάπτυξη μόνο λακτοβακίλλων.

    ♦ η συνηθισμένη μικροχλωρίδα συνήθως απουσιάζει.

    Το Σχ. 6-8. Κυτταρολυτική κολπίτιδα (μικροσκόπιο Gram smear).

    ΘΕΡΑΠΕΥΤΙΚΗ ΕΠΙΤΑΛΛΗΙΚΗ ΑΤΡΟΦΙΑ
    • (Εικ. 6-9) Μικροσκοπική επίχρισμα βάφονται Gram: ♦ ανάλογα με το βαθμό της ατροφίας του κολπικού βλεννογόνου επιθηλίου περιέχει τις διαφορετικές αναλογίες του αριθμού των ενδιάμεσων και παραβασικών κύτταρα, με την ανάπτυξη της ατροφίας αυξάνει τον αριθμό των παραβασικών και βασικών κυττάρων? ♦ αριθμό λευκοκυττάρων είναι τυπικά μικρότερη από 10 στο θέαμα?

    ♦ η μικροχλωρίδα είναι σχεδόν απουσία. μεμονωμένα λακτομορρόπυπα ή μορφοτυπίες UPM μπορούν να βρεθούν σε σπάνια οπτικά πεδία.

  • Μέθοδος καλλιέργειας: ♦ χαμηλή συνολική μικροβιακή μόλυνση (2-4 lg CFU / ml) ·

    ♦ χαμηλοί τίτλοι γαλακτοβακίλλων και UPM.

    Το Σχ. 6-9. Κολπική επιθηλιακή ατροφία (μικροσκοπία κηλίδας, χρώση Gram).

    ΑΞΙΟΛΟΓΗΣΗ ΤΩΝ ΑΠΟΤΕΛΕΣΜΑΤΩΝ ΤΗΣ ΜΙΚΡΟΒΙΟΛΟΓΙΚΗΣ ΕΡΕΥΝΑΣ ΤΟΥ ΑΙΜΑΤΟΣ

    Κατά την κατανομή κοινά παθογόνα (Staphylococcus aureus, Listeria, Klebsiella, άλλα κολοβακτηρίδια, Pseudomonas aeruginosa) και μύκητες έχει διαγνωστική σημασία της ακόμη και μια θετική καλλιέργεια αίματος. Όταν απομονώνονται μικροοργανισμοί που αναγνωρίζονται ως σαπροφύλια δέρματος (αρνητικοί σε κοαγκουλάση σταφυλόκοκκοι, διφθεροειδή, μικροκόκκοι), απαιτούνται δύο θετικές καλλιέργειες αίματος για να επιβεβαιωθεί η πραγματική βακτηριαιμία.

    ΑΞΙΟΛΟΓΗΣΗ ΤΩΝ ΑΠΟΤΕΛΕΣΜΑΤΩΝ ΤΗΣ ΜΙΚΡΟΒΙΟΛΟΓΙΚΗΣ ΜΕΛΕΤΗΣ ΤΗΣ URINE

    Ο βαθμός βακτηριουρίας είναι το κύριο κριτήριο για τη διαφοροποίηση μιας μολυσματικής διεργασίας στην ουροδόχο κύστη από τη μόλυνση των ούρων με φυσιολογική μικροχλωρίδα. Ο βαθμός βακτηριουρίας, που δεν υπερβαίνει τα 3 lg CFU / ml, είναι συνήθως αποτέλεσμα μόλυνσης. Ο βαθμός βακτηριουρίας 3-4 lg CFU / ml θεωρείται ως αμφίβολο αποτέλεσμα και η μελέτη πρέπει να επαναληφθεί. Ο βαθμός βακτηριουρίας, ίσος με και μεγαλύτερος από 5 lg CFU / ml, υποδεικνύει την παρουσία μίας φλεγμονώδους διαδικασίας. Ωστόσο, είναι απαραίτητο να ληφθούν υπόψη οι ιδιαιτερότητες των κλινικών εκδηλώσεων της νόσου και της θεραπείας που διεξάγεται (όχι μόνο αντιβακτηριακά). Για παράδειγμα, με κακή διέλευση ούρων, με τη χαμηλή σχετική πυκνότητά του, στο pH βρίσκεται στα ούρα υγιών ανθρώπων. Η μονοκαλλιέργεια είναι πιο συχνή στις οξείες φλεγμονώδεις διεργασίες και συνδυάζεται με υψηλό βαθμό βακτηριουρίας. Οι ενώσεις μικροοργανισμών είναι πιο συχνές σε χρόνιες διεργασίες. Στην τελική αξιολόγηση των αποτελεσμάτων της μικροβιολογικής εξέτασης των ούρων, είναι απαραίτητο να ληφθούν υπόψη τα δεδομένα της κλινικής εικόνας και άλλων εργαστηριακών μελετών.

    ΠΑΡΑΓΟΝΤΕΣ ΠΟΥ ΕΠΗΡΕΑΖΟΥΝ ΤΟ ΑΠΟΤΕΛΕΣΜΑ

    Η ακρίβεια των μικροβιολογική διάγνωση στην πρώτη θέση εξαρτάται από την τήρηση του δικαιώματος να λάβει vrachomklinitsistom παθολογικό υλικό για την έρευνα και τη χρησιμότητα των πληροφοριών σχετικά με την κατάσταση των ερωτηθέντων ασθενών, δεδομένου ότι τα στοιχεία αυτά εξαρτώνται από την επιλογή της τακτικής μικροβιολογική εξέταση και την ερμηνεία των αποτελεσμάτων. Κατά τη λήψη και τη μεταφορά βιοϋλικών για μικροβιολογική εξέταση πρέπει να τηρούνται οι ακόλουθες απαιτήσεις:

    ● λαμβάνει υλικό από την τοποθεσία της μόλυνσης (όπου το παθογόνο βρίσκεται στο μέγιστο αριθμό), και όταν είναι αδύνατο να πληροί αυτή την απαίτηση, λαμβάνοντας βιοδοκιμασίες που σχετίζονται με εστίες μόλυνσης (ούρων στο νεφρό παθολογία και εκκένωσης της ουροδόχου κύστης από αυλού του τραχήλου όταν ενδομητρίτιδα)? ● απαλλαγή από τον κόλπο, του τραχήλου της μήτρας, της ουρήθρας πριν από τη χειρουργική εξέταση του κόλπου. βεβαιωθείτε ότι ο ασθενής δεν έχει χρησιμοποιήσει την τοπική θεραπεία τουλάχιστον τις τελευταίες 3 ημέρες? ● λάβει το υλικό πριν από την έναρξη της αντιμικροβιακής θεραπείας, και αν δεν μπορεί να ικανοποιήσει την απαίτηση αυτή - λίγο πριν την επόμενη δόση του φαρμάκου (όταν η συγκέντρωση του γίνεται ελάχιστο)? ● ακολουθούν τους κανόνες της άσηπτης δηλ. αποφευχθεί η μόλυνση του δείγματος λαμβάνεται ταυτόχρονη παροδική μικροχλωρίδα? ● χρησιμοποιείται για τη δειγματοληψία αποστειρωμένο βαμβάκι (Dacron) επιχρίσματα και μέσο μεταφοράς (κολπικό έκκριμα, τραχηλικού διαύλου, απαλλαγή τραύματος), δοχεία (ούρα, κόπρανα), σύριγγες (πύον, εξίδρωμα), φιαλίδια θρεπτικά μέσα για καλλιέργεια αίματος. ekspressdiagnostiki για ιογενείς λοιμώξεις χρησιμοποιώντας tamponyschotki από το οποίο το βιοϋλικό μεταφέρεται πάνω στο slide ή να τοποθετείται σε ένα ειδικό μέσο μεταφοράς? υλικό ● μεταφοράς λαμβάνονται σε ένα εργαστήριο για να προβεί σε εύρος επαρκούς θερμοκρασίας (20-37 ° C) όσο το δυνατόν συντομότερα (όχι περισσότερο από 1-1, 5 ώρες). εάν είναι αδύνατο να εκπληρώσει την απαίτηση χρήσης ενός μέσου μεταφοράς και την αποθήκευση δειγμάτων σε ένα οικιακό ψυγείο (εκτός από το αίμα και το εγκεφαλονωτιαίο υγρό)? ● για υποψία αναερόβια λοίμωξη του υλικού θα πρέπει να είναι δυνατόν να προστατεύσει από το ατμοσφαιρικό οξυγόνο? αμέσως μετά τη λήψη, τοποθετήστε σε αναερόβια δοχεία ή σε ειδικά μέσα μεταφοράς.

    ● σε περίπτωση ύποπτης λοίμωξης από γονόρροια, προτιμάται η άμεση σπορά υλικού που λαμβάνεται με αποστειρωμένο πλαστικό βρόχο σε ένα πυκνό εκλεκτικό μέσο. Στη συνέχεια, το τρυβλίο Petri με σπορά τοποθετείται σε ειδική πλαστική σακούλα με υψηλή περιεκτικότητα σε διοξείδιο του άνθρακα και αποστέλλεται στο εργαστήριο.

    Μεταξύ των παραγόντων που επηρεάζουν την αξιοπιστία της μικροβιολογικής διάγνωσης, μπορούν να εντοπιστούν:

    ● προϋποθέσεις για τη λήψη και τη μεταφορά βιολογικού υλικού · ● κατάλληλη επιλογή μεθόδων μικροβιολογικής έρευνας · ● επαγγελματικά προσόντα μικροβιολόγων ·

    ● τη χρησιμότητα των πληροφοριών σχετικά με την κατάσταση του εξεταζόμενου ασθενούς, η οποία είναι σημαντική από την άποψη της αξιολόγησης των αποτελεσμάτων.

    Είναι απαραίτητο να διατηρείται συνεχώς η επαφή με το εργαστήριο, να διεξάγονται κοινές συζητήσεις κλινικών και μικροβιολόγων για την άμεση αφαίρεση των ισχυρισμών και των ερωτήσεων μεταξύ τους, να αναλύονται περιοδικά, να αξιολογούνται οι εργασίες βελτίωσης.