logo

Ε. Coli gram stain

Μικροοργανισμοί (από τα λατινικά μικροσκοπικά - μικρά) - οργανισμοί που είναι αόρατοι με γυμνό μάτι. Αυτά περιλαμβάνουν πρωτόζωα, σπειροχαίτες, μύκητες, βακτήρια, ιούς, η μελέτη των οποίων ασχολείται με τη μικροβιολογία. Το μέγεθος των μικροοργανισμών μετράται σε μικρόμετρα (μm). Στον μικρόκοσμο υπάρχει μια ευρεία ποικιλία μορφών, οι οποίες χωρίζονται σε ομάδες σύμφωνα με τις γενικές αρχές της βιολογικής ταξινόμησης.

Η πρώτη γενική βιολογική ταξινόμηση δημιουργήθηκε στον XVIII αιώνα, το σύστημα του Σουηδού επιστήμονα C. Linnaeus, που βασίζεται σε μορφολογικές ενδείξεις και περιλαμβάνει τον κόσμο των ζώων και των φυτών. Με την ανάπτυξη της επιστήμης στην ταξινόμηση άρχισαν να λαμβάνουν υπόψη όχι μόνο μορφολογικά, αλλά και φυσιολογικά, βιοχημικά και γενετικά χαρακτηριστικά των μικροοργανισμών. Επί του παρόντος, είναι αδύνατο να μιλήσουμε για μια ενιαία ταξινόμηση όλων των ζωντανών οργανισμών: διατηρώντας ταυτόχρονα ομοιόμορφες αρχές, η ταξινόμηση των μακρο-και των μικροοργανισμών έχει τα δικά της χαρακτηριστικά.

Τα βασικά βήματα όλων των ταξινομήσεων είναι: βασίλειο - διαίρεση - τάξη (ομάδα) - τάξη - οικογένεια - φύλο - είδος. Η κύρια κατηγορία ταξινόμησης είναι το είδος - ένα σύνολο οργανισμών κοινής προέλευσης, παρόμοιες μορφολογικές και φυσιολογικές ενδείξεις και μεταβολισμός.

Οι μικροοργανισμοί ανήκουν στο βασίλειο των προκαρυωτών, οι εκπρόσωποί τους, αντίθετα από τους ευκαρυώτες, δεν διαθέτουν διακοσμημένο πυρήνα. Η κληρονομική πληροφορία στα προκαρυωτικά περικλείεται σε ένα μόριο DNA που βρίσκεται στο κυτταρόπλασμα του κυττάρου.

Για τους μικροοργανισμούς, υιοθετήθηκε μια ενιαία διεθνής ταξινόμηση το 1980, η οποία βασίζεται στο σύστημα που προτείνει ο Αμερικανός επιστήμονας Bergi.

Για να προσδιοριστεί σε ποια είδη ανήκει ένας μικροοργανισμός, είναι απαραίτητο να μελετηθούν τα χαρακτηριστικά του (κυτταρικό σχήμα, σπορίωση, κινητικότητα, ενζυματικές ιδιότητες) χρησιμοποιώντας διάφορες μεθόδους και, με καθοριστικό παράγοντα, να βρεθεί η συστηματική του θέση - να προσδιοριστεί.

Στο εσωτερικό του είδους υπάρχουν εναλλακτικές δυνατότητες: οι μορφοποιοί διαφέρουν στη μορφολογία, οι βιοτοποιοί - στις βιολογικές ιδιότητες, οι χημοριαστικοί παράγοντες - στην ενζυματική δραστηριότητα, οι σεροβαριστές - στην αντιγονική δομή, οι παραλλαγές φάγου - στην ευαισθησία στους φάγους.

Για τον προσδιορισμό των μικροοργανισμών υιοθετήθηκε μια γενική βιολογική βιολογική ή διωνυμική (διπλή) ονοματολογία που εισήγαγε ο C. Linney. Το πρώτο όνομα δηλώνει ένα είδος και είναι γραμμένο με κεφαλαίο γράμμα. Το δεύτερο όνομα δηλώνει τον τύπο και γράφεται με πεζά γράμματα. Για παράδειγμα, Staphylococcus aureus - Staphylococcus aureus. Τα ονόματα μπορεί να αντικατοπτρίζουν τα ονόματα των ερευνητών που ανακάλυψαν μικροοργανισμούς: brucella - προς τιμήν του Bruce, Escherichia - προς τιμή του Escherich, κλπ. Περιλαμβάνονται τα ονόματα των οργάνων που επηρεάζουν τον μικροοργανισμό: pneumococci - πνεύμονες, μηνιγγιτιδόκοκκοι - εγκεφαλική μεμβράνη κλπ..

Βακτήρια

Τα βακτήρια είναι μονοκύτταροι οργανισμοί χωρίς χλωροφύλλη. Το μέσο μέγεθος ενός βακτηριακού κυττάρου είναι 2-6 μικρά. Το μέγεθος και το σχήμα των βακτηριακών κυττάρων που είναι εγγενείς σε μικροοργανισμούς ορισμένου τύπου μπορεί να ποικίλουν υπό την επίδραση διαφόρων παραγόντων (ανάλογα με την ηλικία της βακτηριακής καλλιέργειας, του οικοτόπου, κλπ.). Αυτό το φαινόμενο ονομάζεται πολυμορφισμός.

Σύμφωνα με το σχήμα του κυττάρου, τα βακτηρίδια χωρίζονται σε τρεις ομάδες: σφαιρικές, σε σχήμα ράβδου και σπειροειδή (Εικ. 4).

Τα σφαιρικά βακτήρια ονομάζονται κοκκία (από τα Λατινικά, Coccus - Berry) και έχουν κυτταρική διάμετρο 0,5-1 micron. Η μορφή των cocci είναι ποικίλη: σφαιρική, λόγχη, σχήμα φασολιού. Σύμφωνα με την αμοιβαία διάταξη των κυττάρων μετά τη διαίρεση, διακρίνονται από τα cocci: micrococci (από τα λατινικά, micros - μικρά) - τα κύτταρα διαιρούνται σε διαφορετικά επίπεδα και βρίσκονται χωριστά. Διπλόκοκκοι (από το λατινικό διπλό - διπλό) - τα κύτταρα διαιρούνται σε ένα επίπεδο και στη συνέχεια διατεταγμένα σε ζεύγη. Αυτές περιλαμβάνουν τους πνευμονοκόκκους λογχοειδούς και τους γονοκοκκικούς φασολιών και τους μηνιγγιόκοκκους. Οι στρεπτόκοκκοι (από την αλυσίδα των Lattes Streptos) - τα κύτταρα διαιρούνται σε ένα επίπεδο και δεν αποκλίνουν, σχηματίζοντας μια αλυσίδα. Staphylococcus (από τη λατινική Staphyle - δέσμη) - τα κύτταρα χωρίζονται σε διαφορετικά επίπεδα, σχηματίζοντας συστάδες με τη μορφή ενός τσαμπιού σταφυλιών? τετράκοκκοι (από τετρακόσια τετραγωνικά) - τα κύτταρα χωρίζονται σε δύο αμοιβαία κάθετα επίπεδα και τοποθετούνται σε τέσσερα. Sarcins (από τη Lat. Sarcio - σύνδεση) - τα κύτταρα χωρίζονται σε τρία αμοιβαία κάθετα επίπεδα και διαρρυθμισμένα με τη μορφή μπάλες ή συσκευασίες 8 ή 16 κυττάρων σε κάθε ένα.

Τα Cocci είναι ευρέως διαδεδομένα στο εξωτερικό περιβάλλον, καθώς και στους ανθρώπους και τα ζώα. Σχεδόν όλες οι ομάδες κοκκίων, εξαιρουμένων των μικροκοκκίων, των τετρακόκκων και των φορκινών, περιλαμβάνουν παράγοντες που προκαλούν μολυσματικές ασθένειες.

Οι μορφές σε σχήμα ράβδου ονομάζονται βακτηρίδια. Τα μέσα μεγέθη τους έχουν μήκος από 1 έως 6 μικρά και πάχος από 0,5 έως 2 μικρά.

Τα βακτήρια διαφέρουν ως προς την εμφάνιση: τα άκρα τους μπορούν να στρογγυλευτούν (E. coli), να τεμαχιστούν (παθογόνα του άνθρακα), να εντοπιστούν (παθογόνος παράγοντας της πανώλης) ή να παχυριστούν (παθογόνο διφθερίτιδας). Μετά τη διάσπαση, τα βακτήρια μπορούν να τοποθετηθούν σε ζεύγη - diplobacter (Klebsiella), μια αλυσίδα (παθογόνο του άνθρακα), μερικές φορές υπό γωνία μεταξύ τους ή διαγώνια (διφθερίτιδας). Τα περισσότερα βακτήρια διαλύονται τυχαία.

Μεταξύ των βακτηρίων υπάρχουν καμπύλες μορφές - vibrios (ο αιτιολογικός παράγοντας της χολέρας).

Οι σπείρες και οι σπειροχέτες ανήκουν σε στρογγυλεμένες μορφές. Το σχήμα των κυττάρων τους μοιάζει με μια σπείρα. Οι περισσότεροι orleznetvorny spirill.

Η δομή του βακτηριακού κυττάρου

Μαζί με ένα μικροσκόπιο φωτός, χρησιμοποιούνται ηλεκτρονικές μικροσκοπικές και μικροχημικές μελέτες για τη μελέτη της δομής του βακτηριακού κυττάρου, οι οποίες επιτρέπουν τον προσδιορισμό της υπερδομής του βακτηριακού κυττάρου.

Ένα βακτηριακό κύτταρο (Σχήμα 5) αποτελείται από τα ακόλουθα μέρη: μεμβράνη τριών στρωμάτων, κυτταρόπλασμα με διάφορες εγκλείσεις και πυρηνική ουσία (νουκλεοειδές). Πρόσθετοι δομικοί σχηματισμοί είναι οι κάψουλες, οι σπόροι, οι μαστίγες, οι πίνουν.

Το κυτταρικό τοίχωμα αποτελείται από το εξωτερικό βλεννογόνο στρώμα, το κυτταρικό τοίχωμα και την κυτταροπλασματική μεμβράνη.

Το βλεννογόνο καψικό στρώμα βρίσκεται έξω από το κελί και εκτελεί προστατευτική λειτουργία.

Το κυτταρικό τοίχωμα είναι ένα από τα κύρια δομικά στοιχεία του κυττάρου, διατηρώντας το σχήμα του και διαχωρίζοντας το κύτταρο από το περιβάλλον. Μια σημαντική ιδιότητα του κυτταρικού τοιχώματος είναι η επιλεκτική διαπερατότητα, η οποία εξασφαλίζει τη διείσδυση των απαραίτητων θρεπτικών συστατικών (αμινοξέα, υδατάνθρακες κλπ.) Στο κύτταρο και την απέκκριση μεταβολικών προϊόντων από το κύτταρο. Το κυτταρικό τοίχωμα διατηρεί μια σταθερή οσμωτική πίεση μέσα στο κύτταρο. Η αντοχή του τοίχου παρέχει murein, μια ουσία της φύσης του πολυσακχαρίτη. Ορισμένες ουσίες καταστρέφουν το κυτταρικό τοίχωμα, όπως η λυσοζύμη.

Τα βακτήρια εντελώς απαλλαγμένα από το κυτταρικό τοίχωμα ονομάζονται πρωτοπλάστες. Διατηρούν την ικανότητα να αναπνέουν, να διαιρούν, να συνθέτουν ένζυμα. σε εξωτερικούς παράγοντες: μηχανική βλάβη, οσμωτική πίεση, αερισμός, κλπ. Οι πρωτοπλάστες μπορούν να σωθούν μόνο σε υπερτονικές λύσεις.

Τα βακτηρίδια με μερικώς καταστραφεί κυτταρικό τοίχωμα ονομάζονται σφαιροπλάστες. Εάν καταστείλετε τη διαδικασία σύνθεσης κυτταρικού τοιχώματος χρησιμοποιώντας πενικιλλίνη, τότε σχηματίζονται μορφές L, οι οποίες σε όλα τα είδη βακτηρίων είναι σφαιρικά μεγάλα και μικρά κύτταρα με κενοτόπια.

Η κυτταροπλασματική μεμβράνη προσαρμόζεται σφιχτά στο εσωτερικό του κυτταρικού τοιχώματος. Είναι πολύ λεπτό (8-10 nm) και αποτελείται από πρωτεΐνες και φωσφολιπίδια. Είναι ένα οριακό ημιπερατό στρώμα μέσω του οποίου τροφοδοτείται το κύτταρο. Η μεμβράνη περιέχει ένζυμα πεμεράσης που διεξάγουν ένζυμα μεταφοράς δραστικής ουσίας και αναπνοής. Η κυτταροπλασματική μεμβράνη σχηματίζει μεσοσώματα που εμπλέκονται στην κυτταρική διαίρεση. Όταν ένα κύτταρο τοποθετείται σε ένα υπερτονικό διάλυμα, η μεμβράνη μπορεί να διαχωρίζεται από το κυτταρικό τοίχωμα.

Κυτταρόπλασμα - τα εσωτερικά περιεχόμενα του βακτηριακού κυττάρου. Είναι ένα κολλοειδές σύστημα που αποτελείται από νερό, πρωτεΐνες, υδατάνθρακες, λιπίδια, διάφορα μεταλλικά άλατα. Η χημική σύνθεση και η συνοχή του κυτταροπλάσματος ποικίλλει ανάλογα με την ηλικία του κυττάρου και τις περιβαλλοντικές συνθήκες. Το κυτταρόπλασμα περιέχει πυρηνικό υλικό, ριβοσώματα και διάφορα εγκλείσματα.

Νουκλεοειδές, η πυρηνική ουσία του κυττάρου, η κληρονομική του συσκευή. Η πυρηνική ουσία των προκαρυωτικών, σε αντίθεση με τους ευκαρυώτες, δεν έχει τη δική της μεμβράνη. Το νουκλεοειδές ενός ώριμου κυττάρου είναι ένας διπλός κλώνος DNA που είναι τυλιγμένος σε ένα δακτύλιο. Η γενετική πληροφορία του κυττάρου κωδικοποιείται στο μόριο DNA. Σύμφωνα με τη γενετική ορολογία, μια πυρηνική ουσία ονομάζεται γονίδιο ή γονιδίωμα.

Τα ριβοσώματα βρίσκονται στο κυτταρόπλασμα του κυττάρου και εκτελούν τη λειτουργία της πρωτεϊνικής σύνθεσης. Η σύνθεση του ριβοσώματος περιλαμβάνει 60% RNA και 40% πρωτεΐνη. Ο αριθμός των ριβοσωμάτων στο κύτταρο φθάνει τα 10.000. Όταν ενώνονται μεταξύ τους, τα ριβοσώματα σχηματίζουν πολυσωμικά.

Συμπερίληψη - κόκκοι που περιέχουν διάφορα εφεδρικά θρεπτικά συστατικά: άμυλο, γλυκογόνο, λίπος, βουλουτίνη. Βρίσκονται στο κυτταρόπλασμα.

Τα κύτταρα των βακτηρίων στη διαδικασία ζωτικής δραστηριότητας σχηματίζουν προστατευτικά οργανίδια - κάψουλες και σπόρια.

Η κάψουλα είναι μια εξωτερική συμπιεσμένη βλεννώδης στιβάδα πλησίον του κυτταρικού τοιχώματος. Αυτό είναι ένα προστατευτικό όργανο που εμφανίζεται σε κάποια βακτήρια όταν εισέρχονται στο σώμα ανθρώπων και ζώων. Η κάψουλα προστατεύει τον μικροοργανισμό από τους προστατευτικούς παράγοντες του σώματος (παθογόνα της πνευμονίας και του άνθρακα). Ορισμένοι μικροοργανισμοί έχουν μόνιμη κάψουλα (Klebsiella).

Τα σπόρια βρίσκονται μόνο σε βακτήρια σχήματος ράβδου. Δημιουργούνται όταν ο μικροοργανισμός εισέρχεται σε δυσμενείς περιβαλλοντικές συνθήκες (υψηλές θερμοκρασίες, ξήρανση, αλλαγή pH, μείωση της ποσότητας θρεπτικών ουσιών στο περιβάλλον κλπ.). Τα σπόρια βρίσκονται μέσα στο βακτηριακό κύτταρο και αντιπροσωπεύουν μια συμπαγή περιοχή του κυτταροπλάσματος με ένα νουκλεοειδές, ντυμένο με τη δική του πυκνή μεμβράνη. Στη χημική τους σύνθεση, διαφέρουν από τα βλαστικά κύτταρα σε μικρή ποσότητα νερού, με αυξημένη περιεκτικότητα λιπιδίων και αλάτων ασβεστίου, γεγονός που συμβάλλει στην υψηλή σταθερότητα των σπόρων. Η σπορλαρίωση πραγματοποιείται εντός 18-20 ωρών. όταν ο μικροοργανισμός εισέρχεται στις ευνοϊκές συνθήκες του σπορίου μέσα σε 4-5 ώρες, βλασταίνει σε μια φυτική μορφή. Σε ένα βακτηριακό κύτταρο, σχηματίζεται μόνο ένα σπόριο, επομένως, τα σπόρια δεν είναι αναπαραγωγικά όργανα, αλλά χρησιμεύουν για να υποστούν δυσμενείς συνθήκες.

Τα αερόβια βακτήρια που σχηματίζουν σπόρια ονομάζονται βακίλλους και τα αναερόβια βακτηρίδια καλούνται κλωστρίδια.

Τα σπόρια διαφέρουν σε σχήμα, μέγεθος και θέση στο κελί. Μπορούν να τοποθετηθούν κεντρικά, υποτελικά και τερματικά (Εικ. 6). Το παθογόνο του άνθρακα βρίσκεται κεντρικά, το μέγεθός του δεν υπερβαίνει τη διάμετρο του κυττάρου. Το σπόριο του παθογόνου αλλαντίασης βρίσκεται πιο κοντά στο άκρο του κυττάρου - δευτερεύον και υπερβαίνει το πλάτος του κυττάρου. Στην περίπτωση του παθογόνου του τετάνου, ένα στρογγυλεμένο σπόριο βρίσκεται στο τέλος του κυττάρου - τελικά και υπερβαίνει σημαντικά το πλάτος του κυττάρου.

Τα Flagella είναι όργανα κίνησης που χαρακτηρίζουν τα βακτήρια σχήματος ράβδου. Αυτά είναι τα λεπτά νηματώδη ινίδια που αποτελούνται από μια πρωτεΐνη, φασγκελλίνη. Το μήκος τους υπερβαίνει σημαντικά το μήκος του βακτηριακού κυττάρου. Η Flagella αναχωρεί από το βασικό σώμα, βρίσκεται στο κυτταρόπλασμα και πηγαίνει στην επιφάνεια του κυττάρου. Η παρουσία τους μπορεί να ανιχνευθεί με τον προσδιορισμό της κινητικότητας των κυττάρων υπό μικροσκόπιο, σε ημι-υγρό θρεπτικό μέσο ή με χρώση με ειδικές μεθόδους. Η υπερδομή του μαστιγίου μελετάται στο ηλεκτρονικό μικροσκόπιο. Σύμφωνα με τη θέση του μαστιγίου, τα βακτηρίδια χωρίζονται σε ομάδες (βλέπε σχήμα 6): μονοστρώματα με ένα μαστίγιο (ο αιτιολογικός παράγοντας της χολέρας). amphitrikhs - με τσαμπιά ή μεμονωμένες μαστίγες στα δύο άκρα του κελύφους (σπιρίλα). lofotrichi - με μια δέσμη μαστιγίων στο ένα άκρο του κυττάρου (παράγοντας σχηματισμού αλκαλίων στα κόπρανα). peritrichas - flagella που βρίσκεται σε όλη την κυτταρική επιφάνεια (εντερικά βακτηρίδια). Η ταχύτητα μετακίνησης των βακτηριδίων εξαρτάται από τον αριθμό και τη θέση των μαστιγίων (τα μονοπύρηνα είναι τα πιο δραστικά), την ηλικία των βακτηρίων και την επίδραση των περιβαλλοντικών παραγόντων.

Κοτόπουλα ή κροσσάρια - βιτρώ που βρίσκονται στην επιφάνεια των βακτηριακών κυττάρων. Είναι μικρότερες και λεπτότερες από τις μαστίγες και έχουν επίσης σπειροειδή δομή. Αποτελείται από την κατανάλωση πρωτεΐνης - ρίγανη. Ορισμένοι έπιναν (μερικές εκατοντάδες) χρησιμεύουν για την προσκόλληση βακτηρίων σε ζωικά και ανθρώπινα κύτταρα, ενώ άλλα (μεμονωμένα) περιλαμβάνουν τη μεταφορά γενετικού υλικού από ένα κύτταρο σε ένα κύτταρο.

Μυκόπλασμα

Τα μυκοπλάσματα είναι κύτταρα που δεν έχουν κυτταρικό τοίχωμα αλλά περιβάλλονται από μια κυτταροπλασματική μεμβράνη λιποπρωτεϊνών τριών στιβάδων. Τα μυκοπλάσματα μπορούν να είναι σφαιρικά, ωοειδή, με τη μορφή νηματίων και αστεριών. Τα μυκοπλάσματα σύμφωνα με την ταξινόμηση των Bergs χωρίζονται σε ξεχωριστή ομάδα. Σήμερα, αυτοί οι μικροοργανισμοί λαμβάνουν αυξημένη προσοχή ως παθογόνα φλεγμονώδους φύσης. Τα μεγέθη τους κυμαίνονται από μερικά μικρόμετρα έως 125-150 nm. Τα μικρά μυκοπλάσματα διέρχονται από βακτηριακά φίλτρα και καλούνται μορφές φιλτραρίσματος.

Σπειροχαιτίες

Σπειροχέρτες (από την λατινική speira - κάμψη, chaite - τρίχες) - λεπτές, πλεγμένες, κινητές μονόκυκλες οργανισμούς, που κυμαίνονται σε μέγεθος από 5 έως 500 μικρά σε μήκος και 0,3-0,75 μικρά σε πλάτος. Με τα πρωτόζωα έχουν κοινά έναν τρόπο μετακίνησης μειώνοντας το εσωτερικό αξονικό νήμα που αποτελείται από μια δέσμη ινιδίων. Η φύση της κίνησης της σπιροχείτης είναι διαφορετική: μεταφραστική, περιστροφική, κάμψη, κυματιστή. Η υπόλοιπη κυτταρική δομή είναι χαρακτηριστική των βακτηρίων. Ορισμένες σπιροχείτες είναι ελαφρώς χρωματισμένες με χρωστικές ανιλίνης. Οι σπειροχαιτίες χωρίζονται σε τοκετό ανάλογα με τον αριθμό και το σχήμα των μπούκλες και το άκρο του. Εκτός από τις σαπροφυτικές μορφές που είναι κοινές στη φύση και το ανθρώπινο σώμα, υπάρχουν παθογόνα μεταξύ των σπειροχειών, των αιτιολογικών παραγόντων της σύφιλης και άλλων ασθενειών.

Ρικέτσια

Rickettsia - μικροοργανισμοί σε μέγεθος από 0,2 έως 30 μικρά. Έχουν τη συνήθη κυτταρική δομή των βακτηρίων: διπλοστιβάδα, κυτταρόπλασμα, νουκλεοειδές. Το σχήμα της ρικέττας μπορεί να είναι ράβδος, νηματοειδές και κοκκοειδές. Όλες οι ρικέττες είναι ενδοκυτταρικά παράσιτα, δηλ. Μπορούν να αναπτυχθούν μόνο σε κύτταρα ενός ζωντανού οργανισμού. Προκαλούν μολυσματικές ασθένειες όπως ο τύφος και διάφοροι πυρετοί. Οι φορείς του rickettsiae είναι αρθροπόδων: τσιμπούρια, ψείρες και ψύλλοι, στο σώμα των οποίων πολλαπλασιάζονται τα ρικέτσια.

Ιοί

Οι ιοί (βλέπε εικ. 53) είναι οι μικρότεροι μη κυτταρικοί οργανισμοί. Το σωματίδιο του ιού ονομάζεται virion. Οι διαστάσεις των βιριόντων κυμαίνονται από 15 έως 400 nm. Οι περισσότεροι ιοί μπορούν να παρατηρηθούν μόνο με ηλεκτρονικό μικροσκόπιο. Το κέλυφος του βιριονίου, το καψίδιο, αποτελείται από μόρια πρωτεΐνης. Μέσα είναι ένας μόνο τύπος νουκλεϊκού οξέος - ϋΝΑ ή RNA. Με τον τύπο των νουκλεϊνικών οξέων οι ιοί χωρίζονται σε δύο ομάδες - DNA και RNA ιοί. Όλοι οι ιοί είναι υποχρεωτικά (υποχρεωτικά) παράσιτα και σε εργαστήρια καλλιεργούνται σε έμβρυα κοτόπουλου, ζώα ή καλλιέργειες ιστών. Η μορφή των βιριόνων είναι ποικίλη: σφαιρική, ράβδος, κυβοειδής και σπερματοζωάριο. Η αναπαραγωγή των ιών διεξάγεται με ξεχωριστή σύνθεση του κελύφους και του νουκλεϊκού οξέος στο κύτταρο ξενιστή, ακολουθούμενη από συναρμολόγηση των ιοσωμάτων. Αυτή η διαδικασία ονομάζεται αναπαραγωγή. Στον οργανισμό-ξενιστή, ορισμένοι ιοί σχηματίζουν ενδοκυτταρικά εγκλείσματα και στοιχειώδη σώματα, τα οποία είναι ορατά σε συμβατικό μικροσκόπιο φωτός, δεδομένου ότι οι τιμές τους είναι μερικά μικρόμετρα. Αυτοί οι σχηματισμοί έχουν διαγνωστική αξία. Οι ιοί προκαλούν ασθένειες βακτηρίων, φυτών, ζώων. Οι πιο σημαντικές ανθρώπινες μολυσματικές ασθένειες ιογενούς φύσης είναι η γρίπη, η ιλαρά, η πολιομυελίτιδα, η ηπατίτιδα και η λύσσα.

Μεταξύ των ιών, απομονώνεται μια ομάδα φάγοι (από τον Lat Phagos - καταβροχθίζοντας), προκαλώντας λύση (καταστροφή) μικροβιακών κυττάρων. Ενώ διατηρούνται οι εγγενείς ιδιότητες και η σύνθεση των ιών, οι φάγοι διαφέρουν στη δομή του βιριόντος (βλέπε κεφάλαιο 8). Δεν προκαλούν ασθένειες ανθρώπων και ζώων.

Δοκιμάστε τις ερωτήσεις

1. Πείτε μας για την ταξινόμηση των μικροοργανισμών.

2. Ποιες είναι οι κύριες ιδιότητες των εκπροσώπων του βασιλείου των προκαρυωτών.

3. Καταγράψτε και περιγράψτε τις κύριες μορφές βακτηρίων.

4. Ονομάστε τα κύρια organelles του κυττάρου και το σκοπό τους.

5. Δώστε μια σύντομη περιγραφή των κύριων ομάδων βακτηρίων και ιών.

Μελέτη της μορφολογίας των μικροοργανισμών

Για τη μελέτη της μορφολογίας των μικροοργανισμών που χρησιμοποιούνται μικροσκοπική μέθοδος έρευνας. Μια σημαντική προϋπόθεση για την επιτυχή χρήση αυτής της μεθόδου είναι η σωστή παρασκευή ενός επιχρίσματος από το υπό μελέτη υλικό ή βακτηριακή καλλιέργεια. Ο πολιτισμός αναφέρεται σε μικροοργανισμούς που καλλιεργούνται σε θρεπτικά μέσα στο εργαστήριο.

Τεχνική προετοιμασίας επιχρισμάτων

Για εργασία είναι απαραίτητο να έχετε καθαρά και απολιπανθέντα γυαλιά ολίσθησης και κάλυψης. Τα νέα γυαλιά βράζουν για 15-20 λεπτά σε διάλυμα σόδας 2-5% ή σαπουνόνερο, ξεπλύνετε με νερό και τοποθετήστε το σε αδύναμο υδροχλωρικό οξύ, στη συνέχεια ξεπλύνετε καλά με νερό.

Γυαλιά που έχουν χρησιμοποιηθεί και έχουν μολυνθεί με βαφές ή λάδι εμβάπτισης μπορούν να υποβληθούν σε επεξεργασία με δύο τρόπους: 1) βυθίστε 2 ώρες σε πυκνό θειικό οξύ ή σε χρωμικό μίγμα και στη συνέχεια ξεπλύνετε προσεκτικά. 2) βράζετε για 30-40 λεπτά σε διάλυμα 5% σόδας ή αλκαλίου. Το ακατέργαστο γυαλί μπορεί να απολιπανθεί με το τρίψιμο με σαπούνι και στη συνέχεια να το καθαρίσετε με ένα στεγνό πανί.

Προσοχή! Εάν το γυαλί είναι καλά απολιπανθεί, τότε μια σταγόνα νερού απλώνεται ομοιόμορφα, χωρίς να σπάει σε μικρές σταγόνες.

Το γυαλί αποθηκεύεται σε δοχεία με γειωμένα πώματα σε μείγμα Nikiforov (ίσες ποσότητες αλκοόλης και αιθέρα) ή σε αλκοόλη 96%. Από τα γυάλινα διαλύματα αφαιρούνται με λαβίδες.

Προσοχή! Κατά την εργασία, το γυαλί συγκρατείται με τα δάχτυλα στην άκρη.

Το υλικό για τη μελέτη εφαρμόζεται σε γυάλινη ολίσθηση με βακτηριακό βρόχο, βελόνα ή πιπέτα Pasteur. Ο συνηθέστερα χρησιμοποιούμενος βακτηριακός βρόχος (Σχήμα 7), κατασκευασμένος από ένα νήμα από λευκόχρυσο ή νικέλιο 5-6 cm μήκος Ο βρόχος είναι στερεωμένος σε έναν βρόχο ή σφραγισμένο σε μια γυάλινη ράβδο. Το άκρο του σύρματος κάμπτεται με τη μορφή δακτυλίου μεγέθους 1 × 1,5 ή 2 × 3 μm.

Προσοχή! Ο σωστά προετοιμασμένος βρόγχος όταν βυθίζεται στο νερό και εξάγεται από εκεί διατηρεί το φιλμ νερού.

Πριν από τη δημιουργία ενός επιχρίσματος, το λειτουργικό τμήμα του βρόχου καίγεται στη φλόγα του καυστήρα σε μια κατακόρυφη θέση: πρώτον, ο ίδιος ο βρόχος και στη συνέχεια η μεταλλική ράβδος. Αυτός ο χειρισμός πραγματοποιείται μετά το τέλος της σποράς.

Παρασκευή ενός επιχρίσματος από μια καλλιέργεια που καλλιεργείται σε ένα υγρό θρεπτικό μέσο. Η αντικειμενοφόρος πλάκα γυαλιού καίγεται στον καυστήρα και ψύχεται. Η καλλιέργεια εφαρμόζεται σε γυάλινη αντικειμενοφόρο πλάκα τοποθετημένη σε βάση (πιάτο Petri, τρίποδα). Ο σωλήνας καλλιέργειας συγκρατείται με τον αντίχειρα και το δείκτη του αριστερού χεριού. Ο βρόχος κρατιέται στο δεξί χέρι. Χωρίς την απελευθέρωση του βρόχου, το μικρό δάκτυλο του δεξιού χεριού πιέζει τον φελλό στην παλάμη του χεριού και το αφαιρεί προσεκτικά από το σωλήνα. Η κίνηση πρέπει να είναι ομαλή και ήρεμη. Οι σωλήνες λαιμού καίγονται στη φλόγα του καυστήρα. Εισάγετε έναν βρόχο στο σωλήνα. Ψύξτε τον βρόχο προς το τοίχωμα του σωλήνα και στη συνέχεια βυθίστε τον στην καλλιέργεια. Βγάλτε τον βρόχο χωρίς να αγγίξετε τα τοιχώματα του σωλήνα. Κλείστε το πώμα, πριν τον περάσετε από τη φλόγα του καυστήρα. Τοποθετήστε το σωλήνα σε τρίποδο. Ο βρόχος εφαρμόζεται στην καλλιέργεια σε ένα γυάλινο ολισθητήρα, απλώνεται ομοιόμορφα σε κυκλική κίνηση. Στη συνέχεια ο βρόχος καίγεται στη φλόγα του καυστήρα. Ένα επίχρισμα αφήνεται να στεγνώσει.

Προσοχή! Το επίχρισμα πρέπει να είναι ομοιόμορφα αλεσμένο, λεπτό και μικρό (με δύο copeck νομίσματα).

Παρασκευή ενός επιχρίσματος από μια καλλιέργεια που καλλιεργείται σε ένα πυκνό θρεπτικό μέσο. Μια παρασκευασμένη σταγόνα ισοτονικού διαλύματος χλωριούχου νατρίου (0,9%) εφαρμόζεται στην παρασκευασμένη γυάλινη ολίσθηση με πιπέτα Pasteur ή βρόχο. Η καλλιέργεια προσεγγίζεται προσεκτικά από το άγαρ σε δοκιμαστικό σωλήνα ή δίσκο Petri και γαλακτωματοποιείται σε σταγόνα πάνω στο γυαλί. Το προετοιμασμένο επίχρισμα πρέπει να είναι ομοιόμορφο και όχι παχύ. Όταν στεγνώνει στη γυάλινη ολίσθηση παραμένει ασθενής.

Παρασκευή του επιχρίσματος από το πύον ή τα πτύελα. Το υλικό λαμβάνεται με αποστειρωμένη πιπέτα ή βρόχο και εφαρμόζεται στο μέσο της ολίσθησης. Η δεύτερη γυάλινη ολίσθηση καλύπτει την πρώτη, έτσι ώστε το ένα τρίτο του πρώτου και του δεύτερου γυαλιού παραμένουν ελεύθερα. Γυαλί με προσπάθεια να σπρώχνει προς τα πλάγια. Πάρτε δύο μεγάλα κτυπήματα.

Παρασκευή του επιχρίσματος από το αίμα. Μια σταγόνα αίματος εφαρμόζεται σε γυάλινη ολίσθηση σε απόσταση ενός τρίτου από την αριστερή άκρη. Στη συνέχεια, η άκρη του ειδικά γυαλισμένου γυαλιού, με κλίση σε γωνία 45 °, αγγίξτε μια σταγόνα αίματος. Πατώντας το γυαλισμένο γυαλί στο θέμα, πιέστε το προς τα εμπρός. Ένα σωστά παρασκευασμένο επίχρισμα είναι κιτρινωπό και ημιδιαφανές.

Η προετοιμασία των επιχρισμάτων εκτυπώνει από εσωτερικά όργανα πτώματα και τρόφιμα με στερεά συνοχή. Η επιφάνεια ενός οργάνου ή ενός προϊόντος διατροφής καίγεται με ένα ζεστό νυστέρι και ένα κομμάτι υλικού κόβεται από αυτήν την περιοχή. Οι λαβίδες προσελκύουν απαλά αυτό το κομμάτι και η επιφάνεια της φέτας αγγίζει τη διαφάνεια σε δύο - τρεις θέσεις, κάνοντας μια σειρά από επιχρίσματα, εκτυπώσεις.

Ξήρανση σμέρ

Το επίχρισμα ξηραίνεται στον αέρα σε θερμοκρασία δωματίου. Εάν είναι απαραίτητο, μπορεί να στεγνώσει κοντά στη φλόγα του καυστήρα, κρατώντας το γυαλί σε οριζόντια θέση από τις άκρες με τον αντίχειρα και τον δείκτη, το βούρτσισμα.

Προσοχή! Σε υψηλές θερμοκρασίες μπορεί να συμβεί διακοπή της κυτταρικής δομής.

Καθορισμός σμήγματος

Τα βύσματα σταθεροποιούνται μετά από πλήρη ξήρανση προκειμένου: 1) να σταθεροποιηθούν οι μικροοργανισμοί στο γυαλί, 2) εξουδετερώνει το υλικό. 3) οι σκοτωμένοι μικροοργανισμοί αντιλαμβάνονται καλύτερα το χρώμα. Ένα σταθερό μάκτρο καλείται φάρμακο.

Τρόποι καθορισμού. 1. Φυσική - η φλόγα του καυστήρα: γυαλί λαμβάνουν λαβίδα ή αντίχειρα και το δείκτη και τρεις φορές πραγματοποιείται μέσω του άνω τμήματος της φλόγας του καυστήρα για 6 δευτερόλεπτα.

2. Χημική - στο υγρό: Τα κυτταρικά στοιχεία σε επιχρίσματα των επιχρισμάτων αίματος και κάτω από τη δράση των υψηλών θερμοκρασιών καταστρέφονται, έτσι ώστε να αντιμετωπίζονται με ένα από τα υγρών στερέωσης: α) μεθυλ spirtom- 5 λεπτά? β) αιθυλική αλκοόλη - 10 λεπτά, γ) ένα μείγμα Nikiforov - 10-15 λεπτά. δ) ακετόνη - 5 λεπτά. ε) ατμοί οξέος και φορμαλίνης - λίγα δευτερόλεπτα.

Παρασκευάσματα χρωματισμού

Μετά τη σταθεροποίηση, προχωρήστε στη χρώση του φαρμάκου.

Προϊόντα βαφής που παράγονται σε ειδικά εξοπλισμένο τραπέζι, καλυμμένα με λινέλαιο, πλαστικό, γυαλί κλπ. Στο τραπέζι χρειάζεστε ένα δοχείο με απεσταγμένο νερό. Βάση δύο σωλήνων ή ράβδων, συνδεδεμένων με καουτσούκ και στις δύο πλευρές (για τοποθέτηση φαρμάκων). τσιμπιδάκια, κυλίνδρους, πιπέτες, διηθητικό χαρτί, ένα σύνολο χρωστικών, δυνατότητα αποστράγγισης. Το τραπέζι ζωγραφικής πρέπει να βρίσκεται κοντά στη βρύση.

Η αναλογία των μικροοργανισμών προς τις χρωστικές ονομάζεται οργανοληπτικές ιδιότητες τους. Οι χρωστικές ανιλίνης χρησιμοποιούνται ευρέως στη μικροβιολογία. Οι περισσότεροι μικροοργανισμοί αντιλαμβάνονται καλύτερα τις βασικές βαφές.

Οι πιο συνηθισμένες χρησιμοποιούμενες βαφές είναι: κόκκινο (βασικό ματζέντα, ματζέντα οξέος, κόκκινο κοκκώδες, ουδέτερο κόκκινο). μπλε (μεθυλένιο και τολουϊδίνη). ιώδες (γεντιανή, μεθύλιο, κρυσταλλική); καφέ-κίτρινο (Vesuvine, Chrysoidin). πράσινο (λαμπρός, μαλαχίτης).

Όλες οι βαφές παράγονται με τη μορφή άμορφων ή κρυσταλλικών σκονών. Από αυτά παρασκευάζουν διαλύματα κορεσμένης αλκοόλης και φαινόλης και στη συνέχεια για εργασίες που χρησιμοποιούν διαλύματα νερού-αλκοόλης ή νερού-φαινόλης βαφών. Εάν κατά την βαφή χρησιμοποιούνται συμπυκνωμένα διαλύματα βαφής, το παρασκεύασμα είναι προ-επικαλυμμένο με διηθητικό χαρτί στο οποίο εφαρμόζεται βαφή. Ταυτόχρονα, τα κομμάτια βαφής παραμένουν σε χαρτί.

Προσοχή! Μια σταγόνα χρωστικής εφαρμόζεται με μια πιπέτα έτσι ώστε να καλύπτει ολόκληρο το παρασκεύασμα.

Συνταγές χρωστικής

1. Διαλύματα κορεσμένων αλκοολών (αρχικά):

Το μίγμα τοποθετείται σε ένα θερμοστάτη μέχρι να διαλυθεί πλήρως για αρκετές ημέρες. Ανακινείτε καθημερινά. Αποθηκεύονται σε φιάλες με γείσα.

2. Carbol Magenta Zylya (για τη χρώση ανθεκτικών σε οξύ μικροοργανισμών, σπόρων και καψουλών):

Προσοχή! Το καρβολικό οξύ χύνεται στη βαφή και όχι το αντίστροφο.

Το μίγμα ανακινείται ζωηρά για μερικά λεπτά, διηθείται και χύνεται σε ένα φιαλίδιο για αποθήκευση.

3. Fuchsin Pfeiffer (για χρωματισμό στο Gram και για μια απλή μέθοδο χρωματισμού):

Η βαφή παρασκευάζεται αμέσως πριν από τη χρήση.

4. Βιολέτα Carbol gentian (για κηλίδες σε γραμμάρια):

διάλυμα κορεσμένης αλκοόλης

Γυναικοκρασία γεντιανής - 10 ml

καρβολικό οξύ 5% - 100 ml

Τα διαλύματα αναμιγνύονται και φιλτράρονται μέσω ενός φίλτρου χαρτιού.

5. Διάλυμα Lugol (για χρώση gram και άμυλο αντιδραστηρίου):

Το μείγμα τοποθετείται σε φιάλη αλεσμένου γυαλιού, σφραγίζεται καλά και τοποθετείται την ημέρα σε θερμοστάτη, στη συνέχεια προστίθενται 300 ml απεσταγμένου νερού.

6. Αλκαλικό διάλυμα μπλε του μεθυλενίου Leffler:

7. Έγγραφα για το Sinev (για χρωματισμό στο Gram):

Οι λωρίδες του διηθητικού χαρτιού εμποτίζονται με διάλυμα και ξηραίνονται.

Οι μέθοδοι χρωματισμού χωρίζονται σε ενδεικτικές (απλές) και διαφορικές (πολύπλοκες), προσδιορίζοντας τα χημικά και δομικά χαρακτηριστικά του βακτηριακού κυττάρου.

Απλή μέθοδος χρωματισμού

Το φάρμακο τοποθετείται στη βάση για ζωγραφική, το υλικό δοκιμής επάνω. Ένα διάλυμα χρωστικής εφαρμόζεται σε αυτό με μια πιπέτα. Μετά τον καθορισμένο χρόνο, η βαφή χύνεται προσεκτικά, το παρασκεύασμα πλένεται με νερό και ξηραίνεται με διηθητικό χαρτί. Με μια απλή μέθοδο, χρησιμοποιήστε μία βαφή. Το μπλε του μεθυλενίου και το αλκαλικό μπλε Το Leffler χρωματίζει το φάρμακο για 3-5 λεπτά, με το Pfeiffer fuchsin 1-2 λεπτά (βλ. Σχήμα 4).

Μία σταγόνα εμβαπτιζόμενου ελαίου εφαρμόζεται στο έγχρωμο και ξηρό προϊόν και μικροσκοπικά χρησιμοποιώντας ένα σύστημα εμβάπτισης.

Τεχνικές περίπλοκων χρωμάτων

Γεύση Gram (γενική μέθοδος). Η πιο κοινή μέθοδος διαφορικού χρωματισμού είναι η χρώση Gram.

Ανάλογα με τα αποτελέσματα της χρώσης, όλοι οι μικροοργανισμοί χωρίζονται σε δύο ομάδες - θετικές κατά gram και αρνητικές κατά gram.

Gram-θετικών βακτηριδίων τοιχώματος κυττάρου περιέχουν άλας μαγνησίου του RNA το οποίο σχηματίζει ένα σύμπλοκο ένωσης με ιώδιο και μια βαφή βασικής (γεντιανής, μεθύλιο ή κρυσταλλικό ιώδες). Αυτό το συγκρότημα δεν καταστρέφεται από τη δράση του οινοπνεύματος, και τα βακτήρια διατηρούν το μοβ χρώμα τους.

Τα Gram-αρνητικά βακτηρίδια δεν είναι ικανά να συγκρατήσουν την κύρια βαφή, καθώς δεν περιέχουν το άλας μαγνησίου του RNA. Κάτω από τη δράση του αλκοόλ, η βαφή ξεπλένεται, τα κύτταρα αποχρωματίζονται και χρωματίζονται με μια πρόσθετη χρωστική (φουξίνη) με κόκκινο χρώμα.

1. Στο φάρμακο επιβάλλετε ένα κομμάτι χαρτί στο μπλε και βάλτε μερικές σταγόνες νερό ή διάλυμα ιώδους γεντιανής. Βαφή 1-2 λεπτά Ξεκολλήστε το χαρτί ή απορρίψτε τη βαφή.

2. Χωρίς πλύσιμο με νερό, εφαρμόστε το διάλυμα Lugol μέχρις μαυρίσματος (1 λεπτό), στη συνέχεια η βαφή αποστραγγίζεται.

3. Μην πλύνετε με νερό, εφαρμόστε αλκοόλη 96% στην απόρριψη της βαφής (30-60 s). Μπορείτε να βάψετε το φάρμακο σε ένα ποτήρι αλκοόλ για 1-2 δευτερόλεπτα.

4. Πλύνετε το παρασκεύασμα με νερό.

5. Βάλτε την φούξιν Pfeiffer για 3 λεπτά, πλύνετε με νερό και στεγνώστε.

Μικροσκοπική χρήση συστήματος βύθισης.

Χρωματισμός στο Tsilu - Nielsen (για ανθεκτικά στα οξέα βακτήρια). Αυτή η μέθοδος χρησιμοποιείται για την αναγνώριση βακτηριδίων φυματίωσης και λέπρας, που έχουν μεγάλη ποσότητα λιπιδίων, κηρού και υδροξυοξέων στην κυτταρική μεμβράνη. Τα βακτήρια είναι ανθεκτικά σε όξινα, αλκαλικά και αλκοολικά. Για να αυξηθεί η διαπερατότητα του κυτταρικού τοιχώματος, το πρώτο στάδιο βαφής πραγματοποιείται με θέρμανση.

1. Το σταθερό παρασκεύασμα καλύπτεται με διηθητικό χαρτί και εφαρμόζεται Zulya fuchsin. Κρατώντας το γυαλί με τσιμπιδάκια, το φάρμακο θερμαίνεται πάνω από τη φλόγα του καυστήρα έως ότου οι ατμοί εκκενώνονται. Προσθέστε ένα νέο τμήμα της βαφής και θερμαίνετε άλλα 2 φορές. Αφού ψύξετε, αφαιρέστε το χαρτί και πλύνετε με νερό.

2. Το παρασκεύασμα αποχρωματίζεται με 5% διάλυμα θειικού οξέος, βυθίζοντας 2-3 φορές σε διάλυμα ή χύνοντας οξύ στο γυαλί, στη συνέχεια πλένεται αρκετές φορές με νερό.

3. Ψεκάστε με διάλυμα νερού-αλκοόλης με κυανό του μεθυλενίου για 3-5 λεπτά, πλύνετε με νερό και στεγνώστε.

Μικροσκοπική χρήση συστήματος βύθισης.

Τα ανθεκτικά στα οξέα βακτηρίδια γίνονται κόκκινα και τα υπόλοιπα γίνονται μπλε (βλ. Εικόνα 4).

Χρώμα στο Ozheshko (αναγνώριση διαφοράς). 1. Σε αποξηραμένο σε αέρα επίχρισμα, ρίξτε μερικές σταγόνες διαλύματος υδροχλωρικού οξέος 0,5% και θερμαίνετε μέχρι να σχηματιστούν ατμοί. Το φάρμακο ξηραίνεται και στερεώνεται πάνω σε φλόγα.

2. Βαφή σύμφωνα με τη μέθοδο Ziehl-Nielsen. Τα σπόρια που είναι ανθεκτικά στα οξέα είναι χρωματισμένα με ροζ-κόκκινο χρώμα και τα βακτηριακά κύτταρα κυανούν (βλέπε σχήμα 4).

Χρωματισμός σύμφωνα με το Burri - Hins (ταυτοποίηση της κάψουλας). Αυτή η μέθοδος ονομάζεται αρνητική επειδή το υπόβαθρο του παρασκευάσματος και το βακτηριακό κύτταρο χρωματίζονται και η κάψουλα παραμένει άβαφη.

1. Σε γυάλινη ολίσθηση τοποθετήστε μια σταγόνα μαύρης μελάνης που έχει αραιωθεί 10 φορές. Κάνει μια σταγόνα πολιτισμού. Ένα γυάλινο επίχρισμα χρησιμοποιείται για να κάνει ένα επίχρισμα, ακριβώς όπως ένα επίχρισμα αίματος, και να στεγνώσει.

2. Σταθερό με χημικά μέσα με αλκοόλ ή με εξάχνωση. Πλένετε απαλά με νερό.

3. Βάλτε το Pfeiffer Fuchsin 3-5 λεπτά. Πλένετε απαλά και στεγνώνετε στον αέρα.

Προσοχή! Μην χρησιμοποιείτε χαρτί φίλτρου για να αποφύγετε την καταστροφή του παρασκευάσματος.

Μικροσκοπική χρήση συστήματος βύθισης. Το φόντο του παρασκευάσματος είναι μαύρο, τα κύτταρα είναι κόκκινα, οι κάψουλες είναι άβαφες (βλέπε σχήμα 4).

Ο χρωματισμός των μικροοργανισμών καθ 'όλη τη διάρκεια ζωής τους

Για να μελετήσουν μια ζωντανή καλλιέργεια, το μπλε του μεθυλενίου και άλλες χρωστικές χρησιμοποιούνται συχνότερα σε μεγάλες αραιώσεις (1: 10.000). Μια σταγόνα του δοκιμαστικού υλικού αναμειγνύεται σε γυάλινη ολίσθηση με μια σταγόνα χρωστικής και καλύπτεται με ένα κάλυμμα. Μικροσκοπική χρήση φακού 40x.

Μελέτη της κινητικότητας των μικροοργανισμών

Για έρευνα χρησιμοποιώντας μια καλλιέργεια βακτηρίων που αναπτύσσονται σε ένα υγρό θρεπτικό μέσο ή ένα εναιώρημα βακτηρίων σε ένα ισοτονικό διάλυμα χλωριούχου νατρίου.

Η μέθοδος θρυμματισμένης πτώσης. Μια σταγόνα καλλιέργειας διοχετεύεται με πιπέτα σε γυάλινο ολισθητήρα και καλύπτεται με ένα κάλυμμα. Προκειμένου να αποφευχθεί ο σχηματισμός φυσαλίδων αέρα, το κάλυμμα γυαλιού τροφοδοτείται με μια άκρη στο άκρο της πτώσης και χαμηλώνει απότομα. Για την προστασία του φαρμάκου από την ξήρανση τοποθετείται σε ένα υγρό θάλαμο.

Ο υγρός θάλαμος είναι ένα τρυβλίο Petri, στον πυθμένα του οποίου υπάρχει ένα υγρό διηθητικό χαρτί. Δύο αγώνες τοποθετούνται στο χαρτί και η προετοιμασία τοποθετείται επάνω τους. Κύπελλο με κάλυμμα.

Μικροσκοπικά μεγεθύνετε το φακό 40x σε σκοτεινό πεδίο (βλ. Κεφάλαιο 2).

Η μέθοδος της ανάρτησης σταγόνων (σχήμα 8). Για την παρασκευή του φαρμάκου απαιτείται γυαλί με τρύπα, γυαλί κάλυψης και βαζελίνη. Οι άκρες της οπής καλύπτονται με ένα λεπτό στρώμα βαζελίνης.

Στο κάλυμμα γυαλιού εφαρμόζεται μια σταγόνα καλλιέργειας. Στη συνέχεια, καλύψτε προσεκτικά το κάλυμμα με ένα πηγάδι, έτσι ώστε η σταγόνα να βρίσκεται στο κέντρο. Γυαλισμένο γυαλί γυρίστε γρήγορα το γυαλί του καλύμματος επάνω. Η σταγόνα βρίσκεται στο ερμητικό θάλαμο και παραμένει για μεγάλο χρονικό διάστημα. Όταν η μικροσκοπία, πρώτα με μια μικρή μεγέθυνση (8 ×) βρίσκει την άκρη μιας σταγόνας, και στη συνέχεια διεξάγει μια μελέτη του φαρμάκου σε μεγάλη μεγέθυνση.

Δοκιμάστε τις ερωτήσεις

1. Πώς να προετοιμάσετε ένα βακτηριακό βρόχο;

2. Ποιοι είναι οι στόχοι και οι μέθοδοι για τον καθορισμό των εγκεφαλικών επεισοδίων;

3. Ποιες είναι οι βασικές βαφές.

4. Ποιες μέθοδοι μελετούν την κινητικότητα των μικροοργανισμών;

Εργασία

1. Πάρτε έτοιμα παρασκευάσματα, μελετήστε τα και τραβήξτε τις βασικές μορφές μικροοργανισμών.

2. Προετοιμάστε κηλίδες από διάφορα υλικά (καλλιέργεια, πύον, αίμα, κηλίδες-εκτυπώσεις).

3. Παρασκευάσματα χρωμάτων με σύνθετες μεθόδους (Gram, Zill - Nielsen, Ozheshko, Burri - Hins).

Ε. Coli gram stain

Το Σχ. 1.26. Προσδιορισμός της τοξικότητας των διαβητειών Corynebacteria σε τροποποιημένη μέθοδο

Ι - σταφυλόκοκκοι 2 - στρεπτόκοκκους 3 - σαρδέλας 4 - γονόκοκκους 5 - πνευμονοκόκκων 6 - κάψουλα πνευμονοκόκκων 7 - Corynebacterium διφθερίτιδα 8 - Clostridium 9 - βάκιλο 10 - Vibrio 11 - spirillae 12 - Treponema 13 - borrelia 14 - Leptospira 15 - ακτινομύκητα 16 - τοποθέτηση flagella a - monotrichi, b - lofotrichi, σε - amphitrihi, όχι λιγότερο [c.29]

Το RPG χρησιμοποιείται ευρέως στη διάγνωση ασθενειών. που προκαλούνται από ιούς, ρικέτσια και βακτήρια που παράγουν εξωτοξίνη. Έχει μεγάλη πρακτική σημασία, έχει τον προσδιορισμό της τοξικότητας της διφθερίτιδας corynebacterium [C.68]

Μικροσκοπία Το υλικό από τον ασθενή μικροσκοπείται μόνο κατόπιν αιτήματος του γιατρού. Υπό αυτές τις συνθήκες, η αποβολή στην βλεννογόνο μεμβράνη του κελύφους ή της μεμβράνης απομακρύνεται με δύο ταμπόν, ένα από τα οποία χρησιμοποιείται για σπορά και το άλλο για την παρασκευή επιχρισμάτων. Ο S. Sirshivpaye κατέχει πολυμορφισμό και δεν δέχεται καλά τις βαφές. Είναι δυνατό να κηλιδωθούν τα επιχρίσματα με οξικό ιώδιο του μεθυλίου, μπλε Leffler, μπλε τολουϊδίνης. σύμφωνα με τον Neisser, σύμφωνα με το Gram (βλ. ένθετο χρώματος, σχήμα 4). Σε κηλίδες από φιλμ, η διφθερίτιδα Corynebacterium έχει τη μορφή απλών ραβδιών με πυκνές σχήματος ράμφους, που είναι διατεταγμένες υπό γωνία, όπως το σχήμα V ή τα δάχτυλα απλώματος, λιγότερο συχνά σχηματίζουν συστάδες που μοιάζουν με τσόχα ή διάσπαρτα καρφιά. Όταν η χρώση με οξικό μεθυλεστέρα πορφυρό βιολετί ή μπλε Leffler ανιχνεύθηκε σαφώς έντονα χρωματισμένο [c.203]

Το Σχ. 59. Προσδιορισμός της τοξικότητας της διφθερίτιδας corynebacterium στην αντίδραση καταβύθισης σε άγαρ.

Τα άκρα των ράβδων θα αποκοπεί, όπως ήταν (άνθρακας βάκιλος), στρογγυλεμένες (E. coli), απότομη (fuzobakterii) ή υπό τη μορφή των πάχυνσης, και στη συνέχεια να κολλήσει σαν ένα ρόπαλο (Corynebacterium διφθερίτιδας). [C.30]

Τα ελαφρά καμπυλωτά ραβδιά ονομάζονται vibrios (χολέρα vibrio). Τα περισσότερα από τα βακτήρια σχήματος ράβδου είναι ασυμβίβαστα, διότι στο τέλος της διαίρεσης τα κύτταρα αποκλίνουν. Εάν στο τέλος της κυτταρικής διαίρεσης παραμένουν δεσμευμένα θραύσματα ανειδίκευτου κυτταρικό τοίχωμα και δεν αποκλίνουν, είναι υπό γωνία μεταξύ τους (Corynebacterium διφθερίτιδα) σχηματίζουν μια αλυσίδα (άνθρακας βάκιλος). [C.30]

Διαχωρίστε μεταξύ του (πρωτεύοντος) και του (δευτερογενούς) φθορισμού του. Με πρωτεύον φθορισμό, το υπό μελέτη αντικείμενο περιέχει ουσίες (βιταμίνες, χρωστικές ουσίες και άλλα μεταβολικά προϊόντα) που είναι ταλαντούχα να φθορίζουν όταν φωτίζονται με υπεριώδη ακτινοβολία. Τα περισσότερα μικροσκοπικά αντικείμενα δεν έχουν το δικό τους φθορισμό και βασίζονται σε αυτά, αντιμετωπίζονται με χρωστικές (φθοροχρώματα) ταλαντούμενα για φθορισμό υπό μικροσκοπία φθορισμού. Όπως φθορόχρωμα αουραμίνης χρησιμοποιείται (για Mycobacterium tuberculosis), ακριδίνη κίτρινο (για γονόκοκκους) korifosfin (για Corynebacterium διφθερίτιδα) flyuorestseinizotiotsianat ή FITC (για την παραγωγή επισημασμένων αντιορούς), και άλλα. [Γ.10]

Οι κόκκοι βουλουτίνης μπορούν να αναγνωριστούν με φθορίζουσα μικροσκοπία. Για το λόγο αυτό το φάρμακο χρωματίζεται με κορφοφωσφίνη. Κίτρινο-πράσινα σώματα βακτηρίων με βολουτίνη-πορτοκαλί-κόκκινα κοκκία εμφανίζονται σε μαύρο φόντο. Όταν εντοπίζονται τα συμβατικά κορυβουβακτήρια, δίνουν αμέσως ένα προκαταρκτικό αποτέλεσμα: Τα μικρόβια βρέθηκαν μορφολογικά όμοια με τα Corynebacteria και η μελέτη διαρκεί [C.204]

Το Σχ. 4. Διφθερίτιδα Corynebacterium, χρωματισμένο με οξικό μεθυλ ιώδες (α) και σύμφωνα με την Neisser (b)

Η χρώση Gram έχει μια σοβαρή διαφορική διάγνωση και χρησιμοποιείται ευρέως στη μικροβιολογία. Staphylococcus aureus, στρεπτόκοκκοι, διφθεριτικά κορυβουβακτήρια, μυκοβακτηρίδιο φυματίωσης κλπ., Είναι θετικά κατά gram βακτήρια. αλλάζοντας τη δομή του κυτταρικού τοιχώματος [c.25]

Βακτηριολογική Εργαστήριο στο BES προσδιορίστηκαν για εξειδικευμένες βακτηριακή μόλυνση, και λοίμωξη παθογόνων και την υπό όρους παθογόνων περιβάλλον μικροχλωρίδας αντικείμενα εναέριου χώρου, το νερό, το έδαφος, την επιθεώρηση των τροφίμων λειτουργούν οργανωμένες ομάδες και άτομα για μεταφορά των παθογόνων εντερικών βακτηρίων. Corynebacterium διφθερίτιδα, μακρύς βήχας, paracoclusum, μηνιγγοκόκκος [c.3]

Δείτε επίσης όρους και άρθρα:

Postbox

Περιεχόμενο του άρθρου1 Ποιο επίπεδο αιμοσφαιρίνης θεωρείται χαμηλό; 2 Λόγω αυτού

ΑΝΕΞΑΡΤΗΤΗ ΚΑΙ ΕΡΓΑΣΤΗΡΙΑΚΗ ΕΡΓΑΣΙΑ

ΘΕΜΑ: ΜΕΘΟΔΟΙ ΕΡΕΥΝΑΣ ΤΗΣ ΜΟΡΦΟΛΟΓΙΑΣ ΒΑΚΤΗΡΙΩΝ. ΜΕΘΟΔΟΣ ΜΙΚΡΟΣΚΟΠΙΚΗΣ ΕΡΕΥΝΑΣ.

ΚΑΤΑΛΟΓΟΣ ΕΡΩΤΗΣΕΩΝ ΕΛΕΓΧΟΥ

1. Προστατευτικός εξοπλισμός μικροοργανισμών. Σπόρια, στάδια και συνθήκες σχηματισμού σπορίων, βιολογική σημασία.

2. Κάψουλες βακτηρίων, το νόημά τους.

3. Flagella, η δομή τους. Cilia. Το σεξ έπινε.

4. Συμπληρωμένες μέθοδοι ζωγραφικής. Τεχνική χρωματισμού για το Gram, Zil-Nelsen, Burri-Hins, Neisser.

5. Μέθοδοι έρευνας μικροοργανισμών στη ζωντανή κατάσταση. Δοκιμή KOH. Η αρχή της μεθόδου.

ΑΝΕΞΑΡΤΗΤΗ ΚΑΙ ΕΡΓΑΣΤΗΡΙΑΚΗ ΕΡΓΑΣΙΑ

Τεχνική βαφής Gram (υποδείξτε ποια χρώματα χρωματίζουν τα βακτήρια σε κάθε βήμα της μεθόδου Gram / χρώμα στο τραπέζι)

Οι κύριες μορφολογικές ομάδες των βακτηριδίων (σχεδιάζονται με τη μορφή χρωματικών σχεδίων σύμφωνα με τη χρώση Gram):

Χρωματισμούς Gram από καλλιέργεια ζωμού σταφυλόκοκκου, καλλιέργεια άγαρ Ε. Coli και μίγματα αυτών. Σχέδια ναρκωτικών.

2 · Παρασκευή ενός βακτηριακού επιχρίσματος διφθερίτιδας, χρώσης με κυανό μεθυλενίου σύμφωνα με τους Leffler και Neisser. Σχέδια ναρκωτικών.

3 ► Εγκατάσταση και καταγραφή των αποτελεσμάτων της δοκιμής CON με καλλιέργειες Staphylococcus aureus και Escherichia coli.

Αποτέλεσμα δοκιμής KOH (με διάλυμα 3%) Ο τοίχος Staphylococcus aureus δεν καταστρέφεται, Ο τοίχος Escherichia coli καταστρέφει τους βρόχους σχηματισμού που εκτείνονται πίσω από τον βρόχο.

ΔΗΜΟΣΙΕΥΣΕΙΣ

(υποδείξτε τις μεθόδους μικροσκοπικής χρώσης και τη μορφολογία των μικροοργανισμών - το σχήμα και τη θέση στο παρασκεύασμα)

4► Παρασκευή ενός επιχρίσματος από καλλιέργεια άγαρ βακίλων που φέρουν σπόρια, χρωματισμό σύμφωνα με τον Zil-Nelsen (ή σύμφωνα με τη μέθοδο Ozheshko), μικροσκοπία και σκίτσο.

Τεχνική χρωματισμού σύμφωνα με το Zill-Nelsen (υποδείξτε σε ποιά χρώματα τα βακτήρια κηλιδώνονται σε κάθε στάδιο χρώσης / χρώματος του τραπεζιού)

* ΜΤ - Mycobacterium tuberculosis. Str - στρεπτόκοκκος.

5► Μικροσκοπία παρασκευασμάτων μικροοργανισμών χρωματισμένων με Ziehl-Nelsen. Σχέδια ναρκωτικών.

6► Προετοιμασία ενός επιχρίσματος από μια καλλιέργεια άγαρ ενός ραβδιούχου ραβδίου, χρωματισμό σύμφωνα με το Burri-Hins, μικροσκοπία και σκίτσο.

7► Προετοιμασία του παρασκευάσματος «θρυμματισμένης πτώσης» ή «κρεμώμενης πτώσης» από έγχυση χόρτου έως κινητικότητα μελέτης (υποδείξτε τα χαρακτηριστικά της μικροσκοπίας παρασκευής)

1) Εφαρμογή αιωρήματος μικροοργανισμών στο γυαλί κάλυψης.

2) Λίπανση των άκρων της οπής στην ολίσθηση με βαζελίνη και τοποθέτηση του γυαλιού του καλύμματος στην ολίσθηση. 3) Το τελικό προϊόν, μικροσκοπικά με στόχο εμβάπτισης

Βακτήρια (αρχαία ελληνικά βακτήριον - ραβδί) - ομάδα (βασίλειο) μικροβίων προκαρυωτικών (απαλλαγμένων από πυρηνικά), συνήθως μονοκύτταρα. Μέχρι σήμερα έχουν περιγραφεί περίπου δέκα χιλιάδες είδη βακτηρίων και θεωρείται ότι υπάρχουν πάνω από ένα εκατομμύριο από αυτά, αλλά η ίδια η εφαρμογή της έννοιας ενός είδους σε βακτηρίδια δημιουργεί ορισμένες δυσκολίες.

Τα Spirillae διαφέρουν στην κυτταρική δομή του σπειροειδούς (τιρμπουσού) και στη διπολική διάταξη του μαστιγίου. ενέργεια που παίρνουν με την αναπνοή. Υπάρχουν πολλά σπέρματα γενών. S. volutans - ένας γιγαντιαίος σπιρίλλος, ο οποίος μπορεί πάντα να βρεθεί στην κοπριά των χοίρων. κέρδισε φήμη μέσα από την ανακάλυψη της "volutin" (πολυφωσφορικά)? σε καθαρή καλλιέργεια, αναπτύσσεται μόνο σε μειωμένη συγκέντρωση 02 (περίπου 5%) · κατά συνέπεια, πρέπει να θεωρείται μικροαεροτοξικότητα. Το Spirillum μείον, ο αιτιολογικός παράγοντας του Sodoku, είναι ασθένεια δαγκώματος αρουραίου.

Η μέθοδος Neisser χρησιμοποιείται για την αναγνώριση των κόκκων βολουτίνης. Το επίχρισμα κηλιδώνεται με οξικό κυανό μεθυλενίου για 2-3 λεπτά, κατά τη διάρκεια του οποίου λαμβάνει χώρα η χημική αλληλεπίδραση της χρωστικής και της βουλουτίνης. Οι κόκκοι βολουτίνης είναι βαμμένοι μαύροι. Όταν πλένεται με νερό, το σώμα των κυττάρων αποχρωματίζεται και στη συνέχεια, σε διάστημα 1 λεπτού, προστίθεται στο κίτρινο-καφέ χρώμα του Vesuvine.

Ε. Coli gram stain

Σε συνέχεια του μικροβιολογικού θέματος - χρωματισμό των βακτηριακών κυττάρων με τη μέθοδο Gram. Το κείμενο αντιγράφει τα σχόλια στο βίντεο (ξαφνικά δεν υπάρχει δυνατότητα για κάποιον να παίξει το βίντεο, αλλά θέλω να συμμετάσχω στην εκπαίδευση).

Στη μικροβιολογία, χρησιμοποιούνται ευρέως διάφορες μέθοδοι χρώσης βακτηρίων. Φυσικά, δεν είναι δυνατό να κάνετε παρατήρηση, χωρίς αυτά τα εξελιγμένα χειρισμούς, αλλά στη συνέχεια, όταν το μικροσκόπιο που σχεδόν δεν βλέπω τίποτα, γιατί ο δείκτης διάθλασης των βακτηρίων κοντά στον συντελεστή διάθλασης του υγρού στο οποίο ζουν. Προκειμένου τα βακτηρίδια ή κάποιες από τις εσωτερικές ή εξωτερικές δομές τους να ξεχωρίζουν ξεκάθαρα από το φόντο, χρησιμοποιούνται διάφορες βαφές. Σήμερα εξετάζουμε τη μέθοδο χρωματισμού του Gram, που αναπτύχθηκε το 1884 από τον δανικό γιατρό Hans Christian Gram.

Η εκτέλεση της τεχνικής αρχίζει με την παρασκευή ενός σταθερού επιχρίσματος καλλιέργειας μικροοργανισμών. Σε γυάλινη ολίσθηση εφαρμόζεται μια σταγόνα φυσιολογικού ορού, στην οποία εφαρμόζεται μικροβιολογικός βρόχος, που καίγεται στη φλόγα του καυστήρα, στα υπό μελέτη βακτήρια. Αυτό μπορεί να είναι είτε στιγμιαία απόξεση είτε επίχρισμα, ή προ-καλλιεργημένη αποικία. Όλα τα στάδια πρέπει να εκτελούνται υπό άσηπτες συνθήκες, κατά προτίμηση στη ζώνη της φλόγας του καυστήρα. Η αποδεδειγμένη μέθοδος εκτέλεσης της τεχνικής προορίζεται μόνο να αντικατοπτρίζει την αλληλουχία της εισαγωγής των ουσιών που είναι απαραίτητες για το χρωματισμό και να εξηγεί το ρόλο κάθε σταδίου.

Η ουσία της τεχνικής στον οπτικό διαχωρισμό των βακτηριδίων σε δύο ομάδες - θετικά κατά gram και gram-αρνητικά. Οι πρώτοι ως αποτέλεσμα της διαφοροποίησης εμφανίζονται υπό μικροσκόπιο χρώματος μπλε ή μοβ, και το τελευταίο σε ροζ χρώμα. Η κύρια διαφορά μεταξύ τους είναι ότι τα αρνητικά κατά gram βακτήρια αντιλαμβάνονται τη χρωστική χειρότερη λόγω της πιο σύνθετης δομής του κελύφους. Συγκεκριμένα, έχουν μια επιπλέον μεμβράνη πάνω από το κυτταρικό τοίχωμα που εμποδίζει τη διείσδυση ανεπιθύμητων ουσιών. Σε αυτή την περίπτωση, η στιβάδα πεπτιδογλυκάνης είναι λεπτότερη από εκείνη των θετικών κατά gram βακτηρίων. Αυτά τα χαρακτηριστικά τους επιτρέπουν να παρουσιάζουν παθογένεια. Τα θετικά κατά Gram βακτήρια μελετώνται ελάχιστα στην ιατρική μικροβιολογία, αφού πολύ λίγα από αυτά είναι ικανά να προκαλέσουν ασθένειες.

Το επίχρισμα στο γυαλί ξηραίνεται στον αέρα ή ψηλά πάνω από τη φλόγα του καυστήρα για να αποφευχθεί ο βρασμός και η μετουσίωση των πρωτεϊνών και στη συνέχεια σταθεροποιείται περνώντας μέσα από τη φλόγα για μικρό χρονικό διάστημα. Έτσι, οι μικροοργανισμοί πεθαίνουν και στερεώνονται με ασφάλεια στη γυάλινη επιφάνεια.

Τώρα είναι καιρός να κάνετε μια βαφή. Αρχικά, εμφανίζεται χρωματισμό ιώδης γεντιανής. Αυτή είναι η κύρια χρωστική ουσία της σειράς τριφαινυλομεθανίου: ένα μείγμα πεντα-και εξαμεθυλοπαραοσαλανιλών με μικρή ποσότητα δεξτρίνης και φουξίνης. Χρησιμοποιείται στην ιατρική όχι μόνο ως βαφή, αλλά και ως αντισηπτικό. Οι αντιμικροβιακές ιδιότητες εξηγούνται από την υψηλή διαπερατότητα μέσω των βακτηριακών μεμβρανών και τις επιδράσεις στις διαδικασίες οξειδοαναγωγής.

Το χρώμα διαρκεί 1-2 λεπτά, μετά το οποίο το ιώδες γεντιανής αποστραγγίζεται και τα δείγματα χύνεται με διάλυμα Lugol. Αυτή η ουσία, νομίζω, είναι γνωστή σε όλους - αντιμετωπίζονται για πονόλαιμο με πονόλαιμο. Το διάλυμα Lugol είναι μια ένωση ιωδίου με ιωδιούχο κάλιο, που του δίνει καλή υδατοδιαλυτότητα. Συνδυάζοντας με κομμάτια βιολέτας γεντιανής, τα οποία διεισδύουν στα κυτταρικά τοιχώματα των βακτηρίων, το ιώδιο σχηματίζει μια ισχυρή μπλε-ιώδη ένωση. Η αντίδραση διαρκεί επίσης 1-2 λεπτά.

Τώρα έχει έρθει η στιγμή για διαφοροποίηση, δηλαδή, ο διαχωρισμός των θετικών κατά gram και αρνητικών κατά Gram βακτηρίων. Για να γίνει αυτό, ένα ποτήρι με ένα εγκεφαλικό επεισόδιο βυθίζεται αρκετές φορές σε ένα δοχείο με 96% αιθυλική αλκοόλη μέχρις ότου οι σταγόνες που πέφτουν έχουν χρώμα ίση με το αλκοόλ στο γυαλί. Σε αυτή τη διαδικασία, το μπλε-ιώδες σύμπλεγμα απομακρύνεται από τα τοιχώματα αρνητικών κατά Gram βακτηρίων, παραμένοντας μόνο στα τοιχώματα των θετικών κατά Gram.

Προκειμένου τα gram-αρνητικά βακτηρίδια να μην εμφανίζονται άχρωμα, το επίχρισμα πλένεται με νερό και επιπλέον χρωματίζεται με ένα υδατικό διάλυμα φουξίνης για την ίδια μαγεία για 1-2 λεπτά. Δεδομένου ότι υπάρχει ήδη βαφή στο τοίχωμα των θετικών κατά gram βακτηρίων, δεν είναι χρωματισμένα με φουξίνη. Τα αρνητικά κατά Gram βακτήρια γίνονται ροζ. Το επίχρισμα τελικά πλένεται με νερό, ξηραίνεται και το παρασκεύασμα είναι έτοιμο για μικροσκοπία.

Micra / Μαθήματα / 2. Μέθοδοι για τη μελέτη της μορφολογίας των βακτηρίων

ΘΕΜΑ: ΜΕΘΟΔΟΙ ΕΡΕΥΝΑΣ ΤΗΣ ΜΟΡΦΟΛΟΓΙΑΣ ΒΑΚΤΗΡΙΩΝ. ΜΕΘΟΔΟΣ ΜΙΚΡΟΣΚΟΠΙΚΗΣ ΕΡΕΥΝΑΣ.

ΚΑΤΑΛΟΓΟΣ ΕΡΩΤΗΣΕΩΝ ΕΛΕΓΧΟΥ

Προστατευτικός εξοπλισμός μικροοργανισμών. Σπόρια, στάδια και συνθήκες σχηματισμού σπορίων, βιολογική σημασία.

Κάψουλες βακτηρίων, το νόημά τους.

Flagella, τη δομή τους. Cilia. Το σεξ έπινε.

Δύσκολες μέθοδοι χρωματισμού. Τεχνική χρωματισμού για το Gram, Zil-Nelsen, Burri-Hins, Neisser.

Μέθοδοι για τη μελέτη μικροοργανισμών στη ζωντανή κατάσταση. Δοκιμή KOH. Η αρχή της μεθόδου.

ΑΝΕΞΑΡΤΗΤΗ ΚΑΙ ΕΡΓΑΣΤΗΡΙΑΚΗ ΕΡΓΑΣΙΑ

Τεχνική βαφής Gram (υποδείξτε ποια χρώματα χρωματίζουν τα βακτήρια σε κάθε βήμα της μεθόδου Gram / χρώμα στο τραπέζι)

1. Χρωματισμός ιώδη γεντιανής (ιώδη γεντιανής)

(χρόνος έκθεσης 1 λεπτό)

2. Επεξεργασία Διάλυμα Lugol

(χρόνος έκθεσης 1 λεπτό)),

(χρόνος έκθεσης 1 λεπτό)

4. Κηλίδωση με πορφυρό νερό ή σαφρανίνη

(χρόνος έκθεσης 2 λεπτά)),

Οι κύριες μορφολογικές ομάδες των βακτηριδίων (σχεδιάζονται με τη μορφή χρωματικών σχεδίων σύμφωνα με τη χρώση Gram):

Χρωματισμούς Gram από καλλιέργεια ζωμού σταφυλόκοκκου, καλλιέργεια άγαρ Ε. Coli και μίγματα αυτών. Σχέδια ναρκωτικών.

(Staphylococcus aureus, Escherichia coli)

2 · Παρασκευή ενός βακτηριακού επιχρίσματος διφθερίτιδας, χρώσης με κυανό μεθυλενίου σύμφωνα με τους Leffler και Neisser. Σχέδια ναρκωτικών.

Χρωματισμός από το leffler

Χρωματισμός από τη Neisser

3 ► Εγκατάσταση και καταγραφή των αποτελεσμάτων της δοκιμής CON με καλλιέργειες Staphylococcus aureus και Escherichia coli.

Αποτέλεσμα δοκιμής KOH (με διάλυμα 3%) Staphylococcus aureus ο τοίχος δεν καταρρέει, Escherichia coli το τοίχωμα καταρρέει σχηματίζοντας βλεννώδη νήματα που εκτείνονται πίσω από τον βρόχο.

Μπλε μεθυλενίου με λεφλά

Κολλάει ακανόνιστα, τυχαία,

Kokkobakteriya - ελαφρώς επιμήκη ραβδιά

Κολλάει με στρογγυλεμένα άκρα

Streptobacilli που σχηματίζουν μια κάψουλα στο σώμα

(υποδείξτε τις μεθόδους μικροσκοπικής χρώσης και τη μορφολογία των μικροοργανισμών - το σχήμα και τη θέση στο παρασκεύασμα)

4► Παρασκευή ενός επιχρίσματος από καλλιέργεια άγαρ βακίλων που φέρουν σπόρια, χρωματισμό σύμφωνα με τον Zil-Nelsen (ή σύμφωνα με τη μέθοδο Ozheshko), μικροσκοπία και σκίτσο.

Τεχνική χρωματισμού σύμφωνα με το Zill-Nelsen (υποδείξτε σε ποιά χρώματα τα βακτήρια κηλιδώνονται σε κάθε στάδιο χρώσης / χρώματος του τραπεζιού)

Χρωματίζοντας μια διαμάχη για Ozheshko

Σε ένα μη σταθερό επίχρισμα, εφαρμόζεται 0,5% διάλυμα ΗΟΙ και θερμαίνεται για 1-2 λεπτά πάνω στο ραβδί, πλένεται με νερό, σταθεροποιείται και στη συνέχεια βλέπε παρακάτω.

Χρωματισμός ανθεκτικών σε οξύ βακτηρίων

1. Επεξεργασία Το χαρτί φίλτρου γεμίζεται με ένα επίχρισμα της καρβολικής φούξίνης του Zielya και θερμαίνεται πάνω από μια φλόγα ενός λαμπτήρα πνεύματος μέχρι να διαχωριστεί ο ατμός.

(χρόνος έκθεσης πριν από την απόρριψη ατμών ),

Επίσης χρειάζεται αφαιρέστε ένα κομμάτι χαρτιού φάρμακο, ξεπλύνετε με νερό

3. Χρωματισμός υδατικό διάλυμα κυανιούχου μεθυλενίου

(χρόνος έκθεσης) 3-5 λεπτά

* ΜΤ - Mycobacterium tuberculosis. Str - στρεπτόκοκκος.

5► Μικροσκοπία παρασκευασμάτων μικροοργανισμών χρωματισμένων με Ziehl-Nelsen. Σχέδια ναρκωτικών.

Χρωματισμός από Zilu-Nelsen.

Mycobacterium tuberculosis στα πτύελα

Χρωματισμός από Zilu-Nelsen.

6► Προετοιμασία ενός επιχρίσματος από μια καλλιέργεια άγαρ ενός ραβδιούχου ραβδίου, χρωματισμό σύμφωνα με το Burri-Hins, μικροσκοπία και σκίτσο.

Χρωματισμός από σύμφωνα με τον Burri-Hins

7► Προετοιμασία του παρασκευάσματος «θρυμματισμένης πτώσης» ή «κρεμώμενης πτώσης» από έγχυση χόρτου έως κινητικότητα μελέτης (υποδείξτε τα χαρακτηριστικά της μικροσκοπίας παρασκευής)

Εφαρμογή αιωρήματος μικροοργανισμών στο γυαλί κάλυψης.

Λίπανση των άκρων της οπής στην ολίσθηση με βαζελίνη και τοποθέτηση του γυαλιού του καλύμματος στην ολίσθηση. 3) Το τελικό προϊόν, μικροσκοπικά με στόχο εμβάπτισης

Βακτηρία (dr.-greek βακτήριο - ράβδος) - ομάδα (βασίλειο),προκαρυωτικό(χωρίς πυρηνικά),μικροοργανισμών, πιο συχνάμονοκύτταρο. Περίπου δέκα χιλιάδες έχουν περιγραφεί μέχρι στιγμής.είδητα βακτήρια και υποτίθεται ότι υπάρχουν πάνω από ένα εκατομμύριο, αλλά η ίδια η εφαρμογή της έννοιας του είδους στα βακτήρια συνδέεται με ορισμένες δυσκολίες.

Τα Spirillae διαφέρουν τη δομή κυττάρων σπιράλ (τιρμπουσόν) και τη διπολική σήψη. ενέργεια που παίρνουν με την αναπνοή. Υπάρχουν πολλά σπέρματα γενών. S. volutans - ένας γιγαντιαίος σπιρίλλος, ο οποίος μπορεί πάντα να βρεθεί στην κοπριά των χοίρων. κέρδισε φήμη μέσα από την ανακάλυψη της "volutin" (πολυφωσφορικά)? σε καθαρή καλλιέργεια αναπτύσσεται μόνο σε χαμηλές συγκεντρώσεις του 02 (περίπου 5%), ωστόσο θα πρέπει να θεωρηθεί mikroaerotolerantnoi.Spirillum μείον -vozbuditel Sodoku - δάγκωμα ασθένειας αρουραίου.

Η μέθοδος Neisser χρησιμοποιείται για την αναγνώριση των κόκκων βολουτίνης. Το επίχρισμα κηλιδώνεται με οξικό κυανό μεθυλενίου για 2-3 λεπτά, κατά τη διάρκεια του οποίου λαμβάνει χώρα η χημική αλληλεπίδραση της χρωστικής και της βουλουτίνης. Οι κόκκοι βολουτίνης είναι βαμμένοι μαύροι. Όταν πλένεται με νερό, το σώμα των κυττάρων αποχρωματίζεται και στη συνέχεια, σε διάστημα 1 λεπτού, προστίθεται στο κίτρινο-καφέ χρώμα του Vesuvine.

Η μέθοδος Ziehl-Nielsen έχει σχεδιαστεί για να διαφοροποιήσει τα ανθεκτικά στα οξέα βακτήρια (αιτιολογικούς παράγοντες της φυματίωσης και της λέπρας) από μη ανθεκτικά στα οξέα.

Το επίχρισμα κηλιδώνεται με καρβολική φουξίνη Tsielya (βασική βαφή) όταν θερμαίνεται για 3-5 λεπτά.

Αποχρωματίζεται με διάλυμα θειικού οξέος (παράγοντας διαφοροποίησης) για 1-2 λεπτά.

Βάλτε χρώμα για 3-5 λεπτά με μπλε του μεθυλενίου (πρόσθετη βαφή).

Το κυτταρικό τοίχωμα των ανθεκτικών σε οξύ βακτηρίων έχει υψηλή περιεκτικότητα σε λιπίδια. Είναι δύσκολο να βαφτεί, αλλά στη συνέχεια να διατηρήσει την κύρια βαφή όταν ο αποχρωματισμός του οξέος. Τα μη-ανθεκτικά στα οξέα βακτήρια κηλιδώνονται εύκολα και στη συνέχεια εύκολα αποχρωματίζονται με οξύ και λεκιάζουν με μια πρόσθετη βαφή.

μέθοδος Orzeszkowa παρόμοια με τη μέθοδο Ziehl-Nielsen, αλλά χαρακτηρίζεται από τη χρήση υδροχλωρικού οξέος ως πρόστυμμα, αποσαθρωτικοί σπόρια κέλυφος το οποίο αντιλαμβάνεται άσχημα βαφές. Μετά την χρώση με υδροχλωρικό οξύ όταν θερμαίνεται για 2-3 λεπτά, το επίχρισμα στερεώνεται και χρωματίζεται σύμφωνα με τη μέθοδο Ziehl-Nielsen. Την ίδια στιγμή, το κυτταρόπλασμα του κυττάρου γίνεται μπλε και τα σπόρια γίνονται κόκκινα.

Η μέθοδος Burri-Hins χρησιμοποιείται για τη λεύκανση καψιδιακών βακτηρίων και βασίζεται στο γεγονός ότι η κάψουλα δεν αντιλαμβάνεται τις βαφές. Η κάψουλα αποκαλύπτεται με αρνητική αντίθεση του φόντου Storm. Για να γίνει αυτό, το μαύρο μελάνι αναμιγνύεται σε καλλιέργεια και στεγνώνει. Αυτό ακολουθείται από στερέωση της φλόγας του καυστήρα, τα μικροβιακά κύτταρα βάφτηκαν με Hins σώμα - υδατικό φουξίνη για 1 λεπτό και πλύθηκε με νερό για 5-10 δευτερόλεπτα. Ως αποτέλεσμα, μια άχρωμη κάψουλα και κόκκινα σώματα μικροβίων είναι σαφώς ορατά σε ένα σκοτεινό υπόβαθρο.